STUART MEDIJ: TEMELJ, PRIPRAVA IN UPORABA - BIOLOGIJA - 2025

Medij Stuart poltrdni agarja ali juhe brez hranil, ki se uporablja za prevoz bioloških vzorcev. Njegov namen je, da se sevi, prisotni v vzorcu, vzdržijo določen čas, vendar brez povečanja mikrobne populacije.

Ustvarili so jo Moffet, Young in Stuart leta 1948, kasneje pa sta jo modificirala Toshach in Patsula. Sestavljen je iz natrijevega glicerofosfata, natrijevega tioglikolata, kalcijevega klorida in agar-agarja. Slednji je prisoten v poltrdnem mediju in odsoten v tekočini. Nekateri laboratoriji mu dodajo metilen modro.

Culturette s prevozom Stuart. Vir: Avtor: CDC / Dr. Gilda Jones, z dovoljenjem: Knjižnica slik javnega zdravja

Običajno se uporabljajo, kadar vzorca ni mogoče takoj sejati. V tem primeru se vzorec položi v transportni medij, medtem ko se prenese v laboratorij, ki bo gojil kulturo.

Na ta način je zagotovljeno, da prisotni mikroorganizmi ostanejo živi, ​​dokler se ne inokulirajo v ustrezen kulturni medij.

V začetku je bila njegova uporaba namenjena prevozu sečničnih ali vaginalnih vzorcev, pri katerih se sumi na prisotnost bakterije Neisseria gonorrhoeae. Kasneje so spoznali, da je njegova uporabnost lahko tudi širša.

Medij Stuart se je izkazal za zelo učinkovitega pri ohranjanju labilnih in prostih mikroorganizmov, kot so Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis. Poleg drugih neprijetnih mikroorganizmov, kot je Enterobacteria.

Sredstvo Stuart v bistvu preprečuje izsušitev vzorca, ohranja osmotsko ravnovesje in ohranja mikroorganizme pri idealnem pH. Po drugi strani pa strateško ta medij ne vsebuje hranilnih snovi, s čimer preprečuje razmnoževanje mikroorganizmov.

Na trgu obstajajo posebne vzorčne transportne naprave, ki vsebujejo to ali drugo prevozno sredstvo, imenovano culturette. Pripravimo jih lahko tudi v laboratoriju.

Osnove

Namen načina prevoza Stuart je ohraniti vzorce čim bližje prvotnemu stanju, dokler niso obdelani.

Natrijev glicerofosfat in kalcijev klorid sta puferski sistem, ki deluje z ohranjanjem pH in osmolarnosti.

Medtem natrijev tioglikolat deluje kot redukcijsko sredstvo in v primeru, da vsebuje agar, mu daje poltrdno konsistenco, da upočasni oksigenacijo medija. Končno je metilen modri indikator oksidacije, torej zazna prisotnost kisika.

Poltrdni medij z redoks indikatorjem je idealen za prevoz vzorcev, pri katerih obstaja sum na prisotnost anaerobnih bakterij.

Značilnosti prevoznih sredstev

Medij Stuart, tako kot vsa prevozna sredstva, izpolnjuje določene značilnosti, vključno z:

-Održava sposobne mikrobne seve, prisotne brez množenja.

-Ne vsebuje hranilnih snovi; Njene spojine so namenjene ohranjanju vzorca hidriranega, v ustreznih pH in osmolarnosti.

-Zavira avtolizo nekaterih občutljivih mikroorganizmov, kot je pnevmokok.

-Če je uporaba začasna, je ne smemo podaljšati predolgo.

Priprava

Poltrdni Stuart medij z redoks indikatorjem

Priprave na dom

Sestavine

Natrijev glicerofosfat 10 gr

Natrijev tioglikolat 1,0 gr

Kalcijev klorid 0,1 gr

Metilen modra 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Destilirana voda 1 L

Sestavine zmešamo in segrevamo, dokler se popolnoma ne raztopijo. Nalijte v cevi ali posebne brise. Vnesemo jih v avtoklav in steriliziramo pri 121 ° C 15 minut. Cevke pustite, da se ohladijo v navpičnem položaju (v obliki bloka). Hranite pri sobni temperaturi.

Priprava s komercialnim medijem

V 1 litru destilirane vode se tehta 14,1 g gojišča. Pogosto segrevajte, dokler se popolnoma ne raztopi, lahko ga zavrete. Preostanek postopka, kot je že opisano.

Dehidrirani medij je kremno obarvan, na njegovi površini pa mora biti modra barva. To je posledica prisotnosti metilen modrega.

PH medija mora biti prilagojen na 7,4 ± 0,2

Tekoče modificiran Stuart srednje (domač)

Sestavine

Natrijev glicerofosfat 10 gr

Natrijev tioglikolat 1 gr

Kalcijev klorid dihidrat 0,1 gr

Destilirana voda 1000 ml

Ima enake sestavine kot poltrdina, vendar nima agarja ali metilensko modrega. V tem primeru se sestavni deli mešajo brez segrevanja in 0,5 ml se razdeli v epruvete velikosti 16 x 125 mm z vijačnimi pokrovčki.

10 minut se sterilizira v avtoklavu pri 121 ° C. Za vzorčenje je treba uporabiti dakronske brise, če je vzorec za PCR ali območje, če gre za kulturo.

Epruvete so shranjene pri sobni temperaturi.

Prijave

Na trgu obstajajo posebne naprave za prevoz vzorcev, imenovane culturette; Ta naprava je podolgovata tanka cev, ki ima v notranjosti bris, na koncu pa je segment, ki vsebuje poltrden ali tekoč Stuart medij.

Naprava se odpre in vzorec se odvzame z brisom. Nato se vstavi nazaj v cev, dokler se konica brisa ne vstavi v poltrdni transportni medij; Nekateri prinesejo poliuretansko gobo, prepojeno s tekočim Stuart medijem, s katerim se vzorec obdrži, ko je moker.

V primeru suma na prisotnost občutljivih mikroorganizmov je treba za odvzem vzorca uporabiti bombažne brise z ogljem.

Vzorci, ki jih je mogoče odvzeti z brisi ali brisi in jih prenašati v tem mediju, so faringealni eksudati, rektalni brisi in različni izločki, vključno z: vaginalno, sečnično, ransko, očesno, ušesno in abscesno.

Med prenosom vzorca v transportnem mediju v laboratorij se je treba izogibati izpostavljenosti medijem ekstremnim okoljskim pogojem (prehladnim ali prevročim). Prav tako se je treba izogibati nenadnim spremembam atmosferskega tlaka.

Čas, v katerem je medij sposoben ohranjati mikroorganizem sposobnega preživeti, bo odvisen od zadevnega seva. Na primer, za mikroorganizme iz rodu Neisserias in Haemophilus lahko ostanejo sposobni do 24 ur, vendar sevi, kot sta Salmonella ali Shigella, lahko trajajo dneve in celo tedne.

Če se oceni, da lahko obdelava vzorca traja več kot 4 dni, je bolje, da vzorec zamrznemo pri –70 ° C.

Identifikacija vzorca v prevoznem sredstvu

Pripravljeno prevozno sredstvo ali komercialna kultura mora imeti nalepko, na kateri so naslednje informacije:

Pacientovo ime in priimek: izogiba se zmedi vzorcev.

Identifikacijska številka: priročno je voditi naročilo pri delu.

Vir odvzema vzorcev: pomaga bakteriologu izbrati ustrezen medij za kulturo.

Gostujoči zdravnik: Včasih so potrebni morebitni posveti.

Datum in čas odvzema vzorca: potrebno je za sprejem ali zavrnitev vzorca glede na čas, ki je pretekel med odvzemom vzorca in sprejemom v laboratorij.

Drugi podatki, ki bi jih bilo koristno priložiti, so:

Domnevna diagnoza: vodi dodajanje posebnih kulturnih medijev glede na domnevno diagnozo.

Zdravljenje z antibiotiki: koristno je, da se priloži v antibiogram.

Vse te informacije so ključne za pravilno obdelavo vzorcev.

QA

Za oceno zmogljivosti gojišča Stuart se lahko znani sevi inokulirajo in hranijo pri 25 ° C, kot so: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 630.

V vseh primerih se pričakuje, da se zadevni mikroorganizem obnovi 24 ur.

Po drugi strani se lahko uporabljajo tudi drugi sevi, kot so: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 in Escherichia coli ATCC 11775.

V vseh primerih se pričakuje obilno okrevanje do 96 ur.

Omejitve

Nekatere študije zagotavljajo, da se lahko glicerofosfat, ki je prisoten v Stuartovem mediju, presnavljajo nekatere koliformne oblike, med drugim Gram negativne bakterije, in se v tem gojišču množijo.

Tveganje se poveča, dlje kot je zamuda obdelava vzorca. Na to vpliva tudi izpostavljenost Stuart-ovega medija visokim temperaturam med prevozom.

Reference

1. "Medij transporta (mikrobiologija)." Wikipedija, prosta enciklopedija. 13. april 2018, 10:36 UTC 1. april 2019. Dostopno na naslovu: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Mediji za kulturo. Prevoz Stuart. Dostopno na: Dostopno na: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuartova prevozna sredstva. Dostopno na: lablinsan.cl
4. Znanstveni MDM. Prednosti mikrobiološkega transportnega medija Stuart. Dostopno na: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017.Na voljo na: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. 5. izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.