TIMOFTALEIN: ZNAČILNOSTI, PRIPRAVA IN UPORABA - BIOLOGIJA - 2025

Thymolphthalein je pH indikator z za znanstveno ime: 3,3-bis -isobenzofuranone -1 (3h) in njegovo kemijsko formulo C ₂₈ H ₃₀ O ₄ . Sintetizira se iz ftalnega anhidrida in timol.

Ta indikator pH ima zelo svojevrstne lastnosti, saj je pri izjemno nizkem pH intenzivno rdeč (pH <0). Nato je široko območje pH, kjer je popolnoma brezbarven (pH 1 - 9,2), z vrtenjem med 9,3 do 10,5, kjer se lahko spremeni v modro, medtem ko je nad 10,5 modro intenzivno.

Kemična struktura timolftaleina pri kislem pH (brezbarven) in pri alkalnem pH (temno modra). Vir: Dannybalanta /Pxhere.com

Njegove aplikacije vključujejo delovanje kislinastega indikatorja pri nekaterih kemičnih reakcijah. Uporablja se tudi kot kromogen v nekaterih kolorimetričnih reakcijah, kjer se ocenjuje encimsko aktivnost. Na primer pri določanju alkalne fosfataze.

Kar zadeva strupenost, je manj škodljiva kot drugi kazalniki pH, ki jo Nacionalno združenje za zaščito pred požari (NFPA) razvrsti kot raven 1 glede na vpliv na zdravje; kar pomeni, da ni rakotvorna niti mutagena.

Prav tako nima posebne strupenosti za noben ciljni organ; to pomeni, da predstavlja majhno tveganje za agresijo na zdravje. Vendar lahko neposreden stik s kožo in sluznico povzroči rahlo draženje.

Po drugi strani je glede na vnetljivost razvrščen kot 1, po reaktivnosti pa kot nič.

značilnosti

Indikator pH timolftalein v trdni obliki je bel prah, v tekočem stanju pa je intenzivno rdeč pri pH manj kot nič, brezbarven pri pH 1-9,2 in modri nad 10,5. Njegova molarna masa je 430,54 g / mol, tališče (258 ° C), vrelišče pa se giblje med 248-252 ° C. Gostota je 0,92 g / ml pri 25 ° C

Netopen je v hladni vodi in topen v etanolu. To ni eksplozivna snov.

Zaradi previdnosti je treba med prevozom, skladiščenjem in rokovanjem hraniti stran od močnih oksidantov.

Priprava

Za volumetrično analizo se običajno uporablja pH indikator timolftalein v koncentraciji 0,1%. To storite tako:

- Odtehtamo 100 mg timolftaleina in ga raztopimo v 100 ml 95% etilnega alkohola.

Pripravimo ga lahko tudi na naslednji način:

- Odtehtamo 100 mg timolftaleina in ga raztopimo v 60 ml absolutnega alkohola ter dodamo 40 ml destilirane vode.

- Shranjujte pri sobni temperaturi (15 - 25 ° C). Pomembno je, da je skladišče hladno, prezračeno in brez vlage.

Prijave

Določitev alkalne fosfataze

Pri določanju tega testa obstaja tehnika, ki temelji na hidroliznem delovanju alkalne fosfataze na timolftalein monofosfat. Če je prisotna alkalna fosfataza, bo hidrolizirala timolftalein monofosfat in sprostila timoltalein.

Tako nastane modri odtenek pri alkalnem pH. Encimska aktivnost alkalne fosfataze je neposredno sorazmerna z intenzivnostjo nastale barve. Absorbanca se odčita pri 590 nm.

Določitev antigena prostate (PSA)

V tem smislu so Shao F in sodelavci leta 2018 razvili kolorimetrično tehniko, pri kateri uporabljajo mezoporne nanodelce silicijevega dioksida, ki lovijo molekule timolftaleina, ki jih močno veže prisotnost feniltrimetiloksisilana.

Ti nanodelci so bili prevlečeni s polietileniminom (PEI), kar je ugodno za vezavo sekundarnega protitelesa proti PSA.

Po drugi strani je bil vzorec bolnika imobiliziran na plošči; in ko je PSA prisoten v stiku z nanodelci, se bo ta vezal na protitelesa. Nanodelci, ki se ne vežejo, bodo odstranjeni.

Kasneje se bo timolftalein zlahka sprostil z dodajanjem alkalne raztopine, ki ustvari modri odtenek. Stopnja barve je sorazmerna s koncentracijo PSA.

Določitev aktivnosti encima arginin kinaza ali fosfokinaza

S pomočjo indikatorja pH timolftalein lahko določimo encimsko aktivnost arginin kinaze. Test temelji na naslednjem:

Encim arginin kinaza je fosfotransferaza, ki sodeluje pri tvorbi fosfoarginina, kar je razvidno iz naslednje kemijske reakcije:

Vir: "Arginin kinaza." Wikipedija, prosta enciklopedija. 10. julij 2018, 13:49 UTC 20. maj 2019, 03:58 wikipedia.org/

Če se ta reakcija izvede proti pH indikatorju timolftalein, je mogoče izmeriti aktivnost encimov. To je mogoče v skladu z naslednjo razlago: reakcija se pojavi pri alkalnem pH, kjer bo timolftalein pokazal svojo modro barvo.

Encimsko aktivnost merimo z bledenjem barve, ki se odraža pri zmanjšanju absorbance pri 575 nm, saj se ob delovanju encima sprostijo protoni (H +), ki zakisajo medij.

Zaradi tega timolftalein izgubi barvo, ko se približa območju obračanja. Če pH pade pod 9,2, postane popolnoma brezbarven.

Intenzivnost modre barve je zato obratno sorazmerna z aktivnostjo encimov.

Toksičnost

V človeškem

Ta spojina je manj strupena kot večina kazalnikov pH, saj ji do zdaj niso pripisani kancerogenih ali mutagenih učinkov. Vendar pa ni popolnoma neškodljiva: ob stiku s kožo in sluznico lahko na omenjenih območjih povzroči pordelost.

Prav tako lahko povzroči neželene reakcije, če jih po nesreči zaužijete ali vdihnete.

V primeru neposrednega stika s kožo in sluznico je treba prizadeto območje vsaj 15 minut sprati z veliko vode. In če opazijo znake draženja, naj gredo v najbližji zdravstveni dom.

Zato je pri ravnanju priporočljivo uporabljati varnostne pripomočke, kot so obleka, rokavice in varnostna očala.

Kljub majhnemu tveganju za vnetljivost je priporočljivo, da se zaradi previdnosti držite stran od vžigalnikov.

Vpliv na okolje

Kljub temu da je manj strupen za zdravje ljudi, je strupen v vodnem okolju in vpliva na organizme, ki jih najdemo tam. Poleg tega ima visoko bioakumulacijsko moč, dolgoročno pa je možno, da lahko nastanejo škodljivi za okolje produkti razgradnje.

Zato se je treba izogibati, da ta izdelek poseže v površinske ali podzemne vode, saj bi vplival na pitno vodo.

V tem smislu morajo laboratoriji, ki uporabljajo ta kazalnik, svoje odpadke odlagati v skladu s predpisi, ki veljajo v vsaki državi.

Reference

1. Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Vpliv naraščajočih koncentracij fitinskega fosforja na aktivnost encimov fitaze in alkalne fosfataze v črevesnem epiteliju mladih ovac. Rev. Cient. (Maracaibo). 2008.18 (1): 59–64. Dostopno na: scielo.org.
2. "Timoftalein." Wikipedija, prosta enciklopedija. 22. februar 2019, 04:40 UTC 19. maj 2019, 22.20, es.wikipedia.org.
3. Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Analiza imunorbentov prostate, specifičnega antigena za encime, brez encimov, sproščena s sproščanjem molekul indikatorja pH, zajetih v mezoporoznih nanodelcih kremena. Analni kem. 2018; 17; 90 (14): 8673-8679
4. Yu Z, Pan J, Zhou HM. Neposredni neprekinjeni pH-spektrofotometrični test za aktivnost arginin kinaze. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545–52.
5. Scharlau. Varnostni list Thymolphthalein. 2013.Dostopno na: javeriana.edu.co
6. Varnostni list Thymolphthalein. MSDS. Nacionalna univerza Heredia, Kostarika. Na voljo v: Thymolphthalein% 20 (3).
7. "Arginin kinaza." Wikipedija, prosta enciklopedija. 10. julij 2018, 13:49 UTC 20. maj 2019, 03:58 en.wikipedia.org.