KONGO RDEČA: ZNAČILNOSTI, PRIPRAVA IN UPORABA - BIOLOGIJA - 2026

Kongo rdeče je azo barvilo za proteine tvorjenih s spajanjem diazonijevo soljo in aktivno aromatski obroč. Ta snov lahko absorbira elektromagnetno sevanje v vidnem spektru, zato ima intenzivno barvo.

Negativno napolnjeno. Zato ima afiniteto do pozitivno nabitih celičnih komponent, kot so nekatere beljakovinske snovi. Njena barva se spreminja glede na pH. V tem smislu je, če je medij kisel (<kot pH3), barva intenzivno modra. Med pH3 - pH 5.2 je fuksija (območje obračanja), pri> pH 5,2 pa je barva temno rdeča.

Dehidrirana raztopina Congo Red in koloida Congo Red. Vir: Pixinio.com in Wikipedia.com

Je zelo vsestranska snov, saj ima več možnosti uporabe. Uporabljajo ga kot barvilo v tekstilni industriji in tudi za celice in tkanine.

Narediti tudi kulturne medije, ki merijo encimsko delovanje kot pH indikator, kot kontrolno snov pri ocenjevanju pravilnega delovanja spektrofotometrov, pri preučevanju tvorbe biofilma ali pri diagnozi amiloidov.

Prav tako je omogočilo razlikovanje bakterijskih in glivičnih serotipov z identifikacijo specifičnih struktur v njihovi steni (lipopolisaharidi).

Značilnosti Konga rdeče

To snov je odkril Böttiger leta 1884. Gre za diazonijev derivat, ki ga tvori bis-diazojska kislina benzidina z naftionsko kislino. Kongo rdeča molekula meri 21 Armstrong, molekulska teža pa je približno 8000 g / mol.

Za kongo rdeče je značilno, da je topen v vodi, še bolj pa v organskih topilih, kot je etanol, tvori koloidno raztopino.

Ima naklonjenost celulozi, amiloidnemu tkivu in pozitivno nabitim celičnim komponentam.

Priprava

Kongo rdeča je pripravljena v različnih koncentracijah, odvisno od tehnike, ki jo bomo uporabili. Večina med drugim uporablja kongo rdeče pri 1%, 2%, 0,1%.

Na primer, da pripravimo 2% kongo rdečo barvo, je treba odtehtati 2 g barvila za suho hrano in dodati 100 ml destilirane vode. Nato se hrani v jantarni steklenici.

Prijave

Kot barvilo v tekstilni industriji

Nekaj ​​časa se je v tekstilni industriji pogosto uporabljal zaradi fiksacije v bombažu, trenutno pa je v uporabi, ker je rakotvoren in tudi zato, ker barva ni stabilna, zaradi drgnjenja se obarva.

Določitev zmogljivosti za nastanek biofilma

Pokazalo se je, da sposobnost mikroorganizmov v biofilmu tvori virulenčni faktor.

V tem smislu se rdeče barvilo iz Konga uporablja kot metoda za določanje nastajanja biofilma. Kongo rdeča se veže na eksopolisaharide v biofilmu. Vendar je v primerjavi z drugimi metodami najmanj priporočljiv zaradi velikih napačnih negativnosti.

Metoda uporablja Congo rdeči agar, ki je sestavljen iz krvnega agarja kot baze, glukoze (10 g / l) in kongoškega rdečega barvila (0,4 g / l). Sove, ki jih je treba ovrednotiti, sejemo v gojišče in ga 24 ur inkubiramo pri 37 ° C in nato 48 ur inkubiramo pri sobni temperaturi.

Pozitiven test je dokazan, če opazimo kristalne kolonije črne barve in suhega videza.

Kontrola kakovosti spektrofotometrov

Za oceno, ali oprema za merjenje absorbance ali transakcije ustreza fotometričnim parametrom, določenim z mednarodnimi predpisi, je mogoče uporabiti preprosto tehniko, s katero lahko ugotovimo, ali oprema oddaja rezultate v območju sprejemljivosti.

Ena od tehnik ocenjevanja je uporaba rdeče kongo, ki temelji na izosbestni točki.

Izosbestična točka je valovna dolžina, pri kateri rdeča Kongo oddaja enako absorbanco ne glede na pH, koncentracijo in temperaturo. Vrednost absorbance je fiksna in se lahko uporablja kot referenca.

Znano je, da je teoretična izosbestna točka kongo rdeče 541 nm. Če je dobljena vrednost drugačna, je znano, da ima oprema težave z odmikom valovne dolžine, zato jo mora preveriti specializiran tehnik.

Priprava kulturnih medijev

Ortiz et al. Opišite gojišče, pripravljeno z rdečim barvilom Kongo in karboksimetilcelulozo, imenovano CMC agar, da bi odkrili mikrobiote celulita; torej proizvajalci celuloze (endoglukoneze, eksoglukanaze in ß-glukozidaza).

Ta medij je intenzivno obarvan. Barva se bo razblinila z delovanjem encima endoglukanaze, ki poruši strukturo karboksimetilceluloze. To kaže na pozitivno reakcijo.

Zmanjšanje viskoznosti in absorbance omogoča količinsko določitev aktivnosti encimov. Na primer pri sevih Streptomyces sp.

Identifikacija mikroorganizmov

Kongo rdeča ima afiniteto do polisaharidnih struktur nekaterih sevov, s čimer doseže identifikacijo teh mikroorganizmov. Med njimi so Escherichia coli in Shigella flexneri.

Kongo rdeče agar plošče se uporabljajo tudi za pridobivanje značilnih kolonij, kot je to primer z Azospirillum sp, ki med drugim daje škrlatno rdeče kolonije.

Obarvanje celic in tkiv

Ena najpogostejših aplikacij kongo rdeče je njegova uporabnost pri diagnozi amiloidoze. Ta nenavadna bolezen je sestavljena iz zunajceličnega kopičenja nenormalnega proteina v različnih organih. Ta nenormalni protein se proizvaja v kostnem mozgu in se imenuje amiloid.

Kongo rdeča ima visoko afiniteto do te snovi. Ta lastnost je bila uporabljena za prikaz njegove prisotnosti na histoloških odsekih tkiv. V ta namen se Congo Red uporablja skupaj s Hematoxylin / Eosinom.

Združevanje amiloidnega tkiva in kongo rdečega se zgodi s nepolarnimi vodikovimi vezmi, med karboksilnimi skupinami in amino skupino. Amiloidni protein zagotavlja karboksilne skupine (COOH), Kongo pa amino skupino.

Amiloidno tkivo je obarvano v različnih odtenkih, od roza do globoko rdeče, ko jih opazimo pod svetlobnim mikroskopom. V mikroskopih z dvojno polarizirano svetlobo opazimo te pripravke s patognomonskim jabolčno-zelenim dvorezanjem.

Se pravi, da predstavljajo dikroizem, saj so amiloidna vlakna anizotropna. To opazovanje potrdi diagnozo.

Obarvanje tkiv s kongo rdečo barvo je združljivo z drugimi diagnostičnimi metodologijami, kot so imunocitokemijske metode, in jih je mogoče celo ponovno obarvati.

Kot pH indikator

Lastnost obračanja proti spremembam pH uporablja tehnika, imenovana kromoendoskopija.

Ta tehnika uporablja barvila in pH indikatorje, ki omogočajo odkrivanje določenih patologij. Med njimi je uporaba rdeče Kongo, ki lahko razkrije zgodnje žarišča raka na želodčni sluznici, saj se uporablja kot označevalec kislosti.

Tehnika temelji na dejstvu, da je kongo rdeča pri kislem pH-u črna. Zato po nanosu raztopine Congo rdeče na želodčno sluznico izberemo območja, kjer je prisotna bledica, za odvzem vzorca za biopsijo, torej tam, kjer ni nastajanja kisline. To kaže na prisotnost rakavega žarišča ali izgubo parietalnih celic.

Reference

1. "Kongo Rdeči." Wikipedija, prosta enciklopedija. 8. maj 2019, 12:13 UTC 16. maj 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Nova metoda za količinsko določitev aktivnosti endoglukanaze, ki temelji na rdečem kompleksu celuloze. Orinoquia. 2011 junij; 15 (1): 7–15. Dostopno na: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Proizvodnja biofilmov v genotipih bakterije Staphylococcus aureus, izolirane iz govejega mastitisa na Kubi. Rev Salud Anim. . 2013 dec; 35 (3): 189–196. Dostopno na: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Kožne manifestacije sistemske amiloidoze kot diagnostični ključ: Klinični primer. Ugledni zdravnik. Čile. 2012 april; 140 (4): 499-502. Na voljo v: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometri in fotokolorimetri Praktični priročnik za posodobitev. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (september-december): Na voljo na: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J in Solís J. Chromoendoscopy pri okužbi s Helicobacter pylori: je to reakcijski čas? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1–3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organska kemija. Uredništvo Reverté. Barcelona, ​​Španija. Dostopno na: books.google.co.ve
8. Murillo M. Histološke tehnike barvanja tkiv. Univerza v Guadalajari, Mehika. Dostopno na: academia.edu
9. Paillié M. Določanje celulolitične, ligninolitične in amilolitične aktivnosti Actinobakterij, izoliranih iz rizosferne zemlje bele detelje (Trifolium repens), 2012. Pontificia Universidad Javeriana, Fakulteta za znanost industrijska mikrobiologija Bogota, DC na voljo na: repozitorij.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Izolacija in identifikacija Azospirillum sp. na gvinejski travi (Panicum max Jacq.) iz doline Cesar. Pašniki in krma, 2010; 33 (3): 1-8 Na voljo v: scielo.