BAKTERIJSKA KULTURA: VRSTE, ZNAČILNOSTI, METODE, ZAHTEVE - BIOLOGIJA - 2026

Bakterijska kultura je posledica sejanje teh mikroorganizmov na hranilnih medijih, da za njihovo razmnoževanje, kar ima za posledico pojav bakterijskih kolonij v trdnih medijih in obsevanja tekočem mediju.

Metoda setve je zelo pomembna, da lahko razporedimo inokulum tako, da se prisotne bakterije razpršijo in lahko razvijejo pravilno izolirane kolonije.

Različni pridelki, ki jih je avtor posadil v laboratoriju za bakteriologijo stavbe biomedicinskih in tehnoloških znanosti, Univerza v Carabobu. Vir: kompozicija fotografij avtorja mag. Marielsa Gil.

Kolonije, pridobljene v trdnem gojišču, so posledica razmnoževanja mikroorganizmov, ki so bili posejani. Vsaka kolonija se začne iz ene same bakterije, ki se lahko eksponentno množi in tvori makroskopsko vidno populacijo.

Enako se dogaja v tekočih gojiščih, vendar v tem primeru rast bakterij opazimo z motnostjo.

Rast bakterij je mogoča, kadar izbrani kulturni medij izpolnjuje prehranske in pH pogoje, potrebne za razvoj določene bakterije. Poleg tega je treba nadzorovati tudi druge spremenljivke, kot so temperatura, čas inkubacije, koncentracija kisika, CO ₂ .

Niso vse bakterijske populacije enake zahteve, čeprav so nekatere lahko skupne skoraj vsem, na primer, da medij vsebuje peptone, res pa je tudi, da obstajajo zahtevnejši mikroorganizmi, ki poleg tega potrebujejo tudi druge posebne snovi, imenovane rastni faktorji.

Na primer, lahko omenimo, da nekateri hemofilci potrebujejo prisotnost faktorja X (hemina) in faktorja V (NAD), da raste.

Vrste bakterijskih kultur

Bakterijske kulture so lahko polimikrobne, čiste ali mešane.

Polimikrobne bakterijske kulture

Polimikrobne kulture so tiste, ki nastanejo s setvijo vzorca, pridobljenega z mesta, kjer je običajna mikrobiota, v kateri lahko najdemo tudi določen patogen.

Primer: pri razvoju kulture brisa grla lahko najdemo patogena, kot je Streptococcus pyogenes, vendar ga bo na tem območju spremljala skupna mikrobiota.

V tem primeru je bistvenega pomena dobra črta, ki omogoča izolacijo rasti različnih vrst bakterij.

Kolonijo z značilnostmi, združljivimi s sevom Streptococcus pyogenes, bomo skrbno dotaknili s platinovo zanko in jo nato posadili v deviško gojišče in tako dobili čisto kulturo tega mikroorganizma.

Iz te čiste kulture je mogoče izvesti vse teste, potrebne za identifikacijo bakterij.

Čista bakterijska kultura

Za učinkovito identifikacijo mikroorganizma je treba delati iz čiste kulture.

Čiste kulture je mogoče dobiti tako kot v prejšnjem primeru, če ponovno posadimo izolirano kolonijo polimikrobne kulture ali če posadimo vzorec, ki prihaja iz običajno sterilnega mesta in obstaja samo en patogen (rast posameznega vrsta bakterij). Primer: ko semena CSF sejejo od bolnika z bakterijskim meningitisom.

Drug način je, da se resesed iz stare čiste kulture pridobi obnovljena čista kultura.

Mešane bakterijske kulture

Te kulture so sestavljene iz mešanice mikroorganizmov, kot se pojavljajo v naravi. V nekaterih industrijskih postopkih je uporaba mešanih kultur primerna.

Dobiti jo je mogoče z združitvijo več čistih kultur, saj te omogočajo preučevanje bakterijskih medsebojnih odnosov.

Uporabni so na primer pri razgradnji ksenobiotikov v industrijski odpadni vodi, saj delujejo kot biorazgradljiva sredstva.

Značilnosti bakterijskih kultur

Morfološke značilnosti kolonij, pridobljenih v bakterijskih kulturah, so lahko zelo različne.

Kolonije so lahko zelo majhne, ​​zmerne ali velike in so lahko suhe ali sluzave, sijoče ali dolgočasne. Glede na teksturo se lahko razlikujejo med gladko in grobo, odvisno od oblike pa so lahko okrogle, ravne, izbočene.

Glede na barvo so lahko: brezbarvna, bela, rumena, roza, fuksija, rdeča, oranžna, bež, sivkasta, zelenkasta, rjava, črna ali s kovinskim sijajem, odvisno od vpletenih bakterij in uporabljenega gojišča.

Meje kolonij so lahko redne ali nepravilne. Drugi pa lahko predstavljajo enoten film, ki je porazdeljen na skoraj celotnem mediju, imenovan "roj". To je značilno za Proteus sp.

Nekatere bakterijske kulture oddajajo vonjave, ki so zelo značilni za vpletene vrste. Na primer, kultura Pseudomonas aeruginosa ima značilen vonj po sadju, rod Proteus pa značilno gnilen vonj.

Primeri kolonij glede na njihovo velikost

Izjemno majhna: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

Majhna: Streptococcus sp, Enterococcus sp.

Zmerno: družina Enterobacteriaceae

Veliki: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

Primer kolonij glede na njihov videz

Suha: Lactobacillus confusus.

Mukoidi: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Briljantna: Klebsiella pneumoniae.

Opaque: Enterococcus faecalis, nekateri sevi vrste Neisseria gonorrhoeae.

Primeri kolonij glede na njihovo teksturo

Gladke kolonije: Micrococcus luteus

Grobe kolonije: Sarcina ventriculi na hranilnem agarju.

Primer kolonij glede na njihovo obliko

Krožniki: Listeria murrayi in Micrococcus luteus na hranilnem agarju.

Ravno: Staphylococcus equorum na hranilnem agarju.

Konveksna: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Primer kolonij glede na njihove meje

Zaobljen rob: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

Nepravilna meja: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Lobed robovi: Bacillus sp.

Primer kolonij glede na njihovo barvo

Prozoren ali brezbarven: Shigella sp na XLD agarju.

Bela: Staphylococcus hominis na krvnem agarju.

Bež: Bacillus sphaericus in Lactobacillus confusus na hranilnem agarju.

Rumena: Staphylococcus aureus in Elizabethkingia meningoseptica na krvnem agaru, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus na hranilnem agarju,

Roza: Escherichia coli na XLD agarju, Micrococcus roseus na hranilnem agarju.

Fuksija: Escherichia coli na agaru Mac Conkey.

Vijolična: Chromobacterium violaceum.

Rdečkasto: Serratia marcescens pri hranilnem agarju pri sobni temperaturi.

Oranžna: Kurthia zopfii na hranilnem agarju.

Sivkast: Sporosarcina sečnina v agarju ekstrakta tal.

Zelenkasto: Pseudomonas aeruginosa na BHI agarju.

Rjava: Enterococcus sp na žolčni esculinski agar.

Črna: Salmonella enteritidis na SS agarju.

S kovinskim sijajem: Escherichia coli na Endovem agarju.

Metode bakterijske kulture

Fakultativna aerobna ali anaerobna bakterijska kultura

Je najbolj razširjena metoda gojenja. To je posledica dejstva, da je na prvem mestu večina bakterij, ki so patogene za človeka, aerobne ali fakultativne anaerobne; in drugič, je veliko cenejši in enostavnejši od anaerobnih kultur. Primer: Mycoplasma pneumoniae in Escherichia coli.

Anaerobna bakterijska kultura

Ta vrsta kulture zahteva popolno zatiranje kisika. Gojišče za anaerobne bakterije bi moralo na splošno vsebovati reducirajoče snovi, kot so: askorbinska kislina, tioglikolat, cistein ali žveplo, da se odstrani toksični učinki kisika, ki ga vsebuje zrak.

Nekateri vsebujejo indikatorje, kot je resazurin, ki je modro ob prisotnosti kisika in brezbarven pri anaerobiozi. Primer: Clostridium tetani.

Bakterijska kultura v mikroaerofiliji

Plošče za kulturo so postavljene v mikroaerofilno napa s prižgano svečo, pokrito. Sveča porabi kisik in ugasne. V tem stanju rastejo nekatere bakterije, na primer Streptococcus sp.

Materiali in zahteve

materiali

Za izvedbo bakterijske kulture so potrebni materiali: Petrijeve posode ali epruvete z gojiščem ali bujon, platinasta zanka, vzorec, Bunsenov gorilnik ali pečica.

Zahteve za izvajanje bakterijske kulture

Kultura bakterij zahteva številne elemente, ki jih je treba upoštevati, na primer hranila v mediju, pH, temperaturo, koncentracijo kisika, CO2, vlažnost.

Hranila

Bakterijske kulture potrebujejo kulturo, ki vsebuje makroelemente in mikroelemente. Med makroelementi lahko omenimo organske snovi, kot so peptoni, aminokisline, ogljikovi hidrati kot vira ogljika in dušika.

Med mikroelementi so med drugim anorganske snovi ali elementi v sledovih mangan, cink, nikelj, bor, klor, selen, silicij, kobalt, baker.

Koncentracija vodikovega iona (pH)

Koncentracija vodikovih ionov (H ⁺ ) in hidroksilnih ionov (OH ^- ) v mediju, kjer se bo razvijala kultura, je življenjskega pomena, saj ti določajo pH.

Najpogosteje pH je nevtralen (pH = 7,0), vendar lahko obstajajo načini, kjer je kiseli ali alkalni pH primeren, na primer, če želite izolirati acidofilne ali alkaliphofilne bakterije.

Temperatura

Temperatura je zelo pomemben dejavnik, ki vpliva na rast bakterijskih kultur. Bakterije so lahko psihrofične (rastejo pri temperaturah <20 ° C, mezofilne (med 20 ° C in 42 ° C), termofilne (40 ° C do 70 ° C), hipertermofilne (70 ° C - 105 ° C).

Potreba po kisiku

Aerobno: rastejo ob prisotnosti kisika.

Mikroaerofilne: rastejo v prisotnosti 5-10% CO _2.

Strogi anaerobi: rastejo brez pomanjkanja kisika.

Fakultativni anaerobi: rastejo v prisotnosti kisika ali brez njega.

Aerotolerant: dobro rastejo brez kisika in prenašajo malo kisika.

Kulturni mediji

Gojišča so posebni prehranski pripravki, ki jih pripravljamo v laboratoriju za pridobitev mikrobne rasti ali kulture. Ti mediji se razlikujejo po konsistenci, sestavi in ​​delovanju. Vsak laboratorij bo pripravil vrsto gojišča, ki ustreza njihovim potrebam.

Zbirka bakterijske kulture

Obstajajo ustanove ali organizacije, ki so namenjene zbiranju, karakterizaciji, vzdrževanju in distribuciji bakterijskih sevov kliničnega, okoljskega ali industrijskega pomena.

Ti sevi se uporabljajo za raziskovalno delo in za izvajanje nadzora kakovosti na medijih kulture.

Primer: sevi American Type Culture Collection, venezuelski center za zbiranje mikroorganizmov (CVCM) in sevi Nacionalnega inštituta za higieno, epidemiologijo in mikrobiologijo Kube (INHEM).

Reference

1. Benavides G, Hermida A. Osamitev in identifikacija domorodne bakterijske flore iz tal parusov Cruz Verde in Guasca. (Cundinamarca). 2008. Bogota. Dostopno na: javeriana.edu.co/biblos
2. Hans S. Splošna mikrobiologija. Izdaje Omega. 1991. Barcelona, ​​Španija. Na voljo v: biolprocariotas.files
3. Weng Z, Junco R, Díaz R. Zbirka mikrobnih kultur: Opombe o njihovem razvoju. Rev Cubana Hig Epidemiol, 2003; 41 (1). Dostopno na: scielo.sld.cu/scielo.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. 5. izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.