NEFELOMETRIJA: KAJ SESTAVLJA IN APLIKACIJE - KEMIJA - 2026

Nephelometry vključuje merjenje sevanja, ki ga delci (v raztopini ali suspenziji) povzročeno in merjenje moči razpršenega sevanja pod kotom glede na smer vpadnega sevanja.

Ko viseči delček udari s svetlobnim snopom, se odseva del svetlobe, absorbira se drug del, drugi se odkloni, preostali del pa se prenaša. Zato svetloba, ko zadene prozoren medij, v katerem je suspenzija trdnih delcev, postane motna.

Kaj je nefelometrija?

Disperzija sevanja z delci v raztopini

V trenutku, ko svetlobni žarek zadene delce suspendirane snovi, smer širjenja žarka spremeni svojo smer. Ta učinek je odvisen od naslednjega:

1.Dimenzije delca (velikost in oblika).

2. Značilnosti suspenzije (koncentracija).

3.Volčna dolžina in jakost svetlobe.

4. Nezgodna svetlobna razdalja.

5. Kot odkrivanja.

6. Indeks loma medija.

Nefelometer

Nefelometer je instrument, ki se uporablja za merjenje suspendiranih delcev v tekočem vzorcu ali plinu. Tako fotocelica, postavljena pod kotom 90 ° proti svetlobnemu viru, zaznava sevanje delcev v suspenziji.

Prav tako je svetloba, ki jo delci odbijajo proti fotocelici, odvisna od gostote delcev. Diagram 1 predstavlja osnovne sestavne dele nefelometra:

Slika 1. Osnovne komponente nefelometra.

TO.

Pri nefelometriji je ključnega pomena imeti vir sevanja z visoko svetlobo. Obstajajo različne vrste, od ksenonskih žarnic in živosrebrnih žarnic, halogenskih volframovih žarnic, laserskega sevanja.

B.

Ta sistem je nameščen med virom sevanja in kiveto, tako da se na ta način na kiveti izognemo sevanju z različno valovno dolžino v primerjavi z želenim sevanjem.

V nasprotnem primeru bi fluorescentne reakcije ali segrevalni učinki v raztopini povzročili odstopanja od meritev.

C.

To je na splošno prizmatična ali valjasta posoda in ima lahko različne velikosti. V tem je študijska rešitev.

D.

Detektor je nameščen na določeni razdalji (na splošno zelo blizu kivete) in je zadolžen za zaznavanje sevanja, ki ga delci razpršijo v suspenziji.

IN.

Na splošno gre za elektronski stroj, ki sprejema, pretvarja in obdeluje podatke, ki so v tem primeru meritve, pridobljene iz opravljene študije.

Odstopanja

Vsaka meritev je odvisna od odstotka napake, ki ga v glavnem poda:

Kontaminirane kivete: v kivetah vsako sredstvo, ki je zunaj raziskovane raztopine, bodisi znotraj kivete ali zunaj, zmanjšuje sevalno svetlobo na poti do detektorja (okvarjene kivete, prah, ki se oprimejo na stene kivete).

Motnje : prisotnost mikrobne kontaminante ali motnosti razprši sevalno energijo in poveča intenzivnost disperzije.

Fluorescentne spojine : to so tiste spojine, ki ob vzbujanju zaradi sevalnega sevanja povzročijo napačne in visoke odčitke gostote razprševanja.

Skladiščenje reagentov : Neustrezna temperatura sistema lahko povzroči neugodne študije in lahko povzroči prisotnost motnih ali oborjenih reagentov.

Nihanja električne energije : Da bi preprečili, da bi sevalno sevanje povzročilo napake, so za enakomerno sevanje priporočljivi stabilizatorji napetosti.

Meroslovne značilnosti

Ker je sevalna moč odkritega sevanja neposredno sorazmerna z masno koncentracijo delcev, imajo nefelometrične študije v teoriji višjo meroslovno občutljivost kot druge podobne metode (kot je turbidimetrija).

Poleg tega ta tehnika zahteva razredčene raztopine. To omogoča minimiziranje tako pojavov absorpcije kot odboja.

Prijave

Nefelometrične študije imajo v kliničnih laboratorijih zelo pomemben položaj. Uporaba sega od določanja imunoglobulinov in proteinov akutne faze, dopolnjevanja in koagulacije.

Zaznavanje imunskega kompleksa

Kadar biološki vzorec vsebuje zanimiv antigen, ga zmešamo (v puferski raztopini) s protitelesom, da nastane imunski kompleks.

Nefelometrija meri količino svetlobe, ki jo raztrese reakcija antigen-protitelo (Ag-Ac), in na ta način odkrijejo imunske komplekse.

To študijo je mogoče izvesti z dvema metodama:

Nefelometrija končne točke:

To tehniko lahko uporabimo za analizo končnih točk, pri kateri se protitelo v preučenem biološkem vzorcu inkubira štiriindvajset ur.

Kompleks Ag-Ac se meri z nefelometrom, količina razpršene svetlobe pa se primerja z isto meritvijo, ki je bila izvedena pred nastankom kompleksa.

Kinetična nefelometrija

Pri tej metodi se nenehno spremlja hitrost nastajanja kompleksov. Hitrost reakcije je odvisna od koncentracije antigena v vzorcu. Tu se meritve vzamejo kot funkcija časa, zato se prva meritev izvede v času "nič" (t = 0).

Kinetična nefelometrija je najpogosteje uporabljena tehnika, saj lahko študijo izvedemo v 1 uri v primerjavi z dolgim ​​časovnim obdobjem metode končne točke. Razmerje disperzije se meri takoj po dodajanju reagenta.

Če je reagent konstanten, se šteje, da je prisotna količina antigena sorazmerna s hitrostjo spremembe.

Druge aplikacije

Nefelometrija se običajno uporablja pri analizi kakovosti vode za določanje jasnosti in nadzor nad postopki obdelave.

Uporablja se tudi za merjenje onesnaženosti zraka, pri čemer je koncentracija delcev določena iz razpršitve, ki jo proizvajajo v vpadni svetlobi.

Reference

1. Britannica, E. (drugo). Nefelometrija in turbidimetrija. Pridobljeno od britannica.com
2. Al-Saleh, M. (drugo). Turbidimetrija in nefelometrija. Pridobljeno s pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (drugo). Pridobljeno s strani technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Analiza turbidimetrične in nefelometrične pretočnosti. Pridobljeno iz repozitorija.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Načela nefelometrije in turbidimetrije. Obnovljeno iz notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Osnove imunologije in serologije. Albany, NY: Thompson Learning. Pridobljeno iz books.google.co.ve
7. Wikipedija. (sf). Nefelometrija (zdravilo). Pridobljeno s strani en.wikipedia.org