NAVZKRIŽNI TESTI: ZA KAJ GRE, TEHNIKA, UTEMELJITEV, FAZE - ZDRAVILO

Crossmatch številne laboratorijske študije so izvedli za ugotavljanje, ali so proizvodi iz krvi darovalca (pretežno cele krvi in pakirani kroglaste) združljivo s krvjo recipienta.

Je dodatni komplementarni test združljivosti z ABO in faktorjem Rh. Razlog za navzkrižno ujemanje je v tem, da imata včasih dva posameznika (prejemnik prejemnik) isto skupino ABO in Rh, vendar je njihova kri še vedno nezdružljiva.

Vir: unsplash.com

Takšna nezdružljivost je posledica prisotnosti protiteles proti vrsti beljakovin rdečih krvnih celic, znanih kot manjši antigeni. Teh antigenov se ne preverja rutinsko, saj gre za krvno skupino (ABO) in Rh faktor.

To je zato, ker so manjši antigeni veliko manj pogosti in imajo pri vsakem posamezniku spremenljiv izraz, zato jih je skoraj nemogoče razvrstiti v kategorije, kot to počnemo s skupino in Rh faktorjem.

Namesto tega se rdeče krvne celice darovalca mešajo s pacientovim serumom (test velikega ujemanja) in bolniškimi rdečimi krvnimi celicami z darovalnim serumom (test manjšega ujemanja), da se ugotovi prisotnost reakcij antigen-protitelo.

Če obstajajo protitelesa proti manjšim antigenom, bodisi v bolnikovem ali dajalčevem serumu, naj bi bil test pozitiven, zato v večini primerov določene enote krvi ni mogoče preliti.

ABO Group

Če želite popolnoma razumeti, kaj gre za navzkrižne reakcije, morate najprej poznati osnove krvnih skupin.

V tem smislu je najpomembnejše vedeti, da se kri lahko razvrsti v štiri skupine: A, B, AB in O.

Vsaka od teh skupin izraža določen protein (antigen) na površini rdečih krvnih celic, ki ga protitelesa potencialnih receptorjev druge skupine prepoznajo kot tuj element.

Pri reakcijah antigen-protitelo pri ujemanju krvi je najbolj presenetljivo to, da ni potrebna predhodna izpostavljenost antigenu, da bi protitelesa obstajala. To je znano kot naravna protitelesa.

Naravna protitelesa

Na splošno velja, da so protitelesa v posameznikovem telesu potrebna, da so bile bele krvne celice posameznika predhodno izpostavljene antigenu.

To pomeni, da pri prvem stiku med tujim antigenom in organizmom ni protiteles, saj se ta ustvarijo kasneje, po začetnem stiku. Zato imunski sistem ne more imeti protiteles na primer določenega virusa, če mu v preteklosti ni bil izpostavljen.

Izjema so le antigeni anti-AB. V teh primerih ima oseba protitelesa proti antigenu, ki jih njihove rdeče krvne celice nimajo, čeprav nikoli niso bile v stiku z rdečimi krvnimi celicami druge osebe. To je znano kot naravna protitelesa.

Antigeni in protitelesa, povezana s krvno skupino

Krvne skupine določimo v primeru sistema ABO s prisotnostjo specifičnih antigenov (A ali B) na membrani rdečih krvnih celic in v nasprotju s tem protitelesa proti odsotnemu antigenu na membrani eritrocitov.

Tako oseba s krvno skupino A izraža antigen A na površini svojih rdečih krvnih celic, medtem ko v serumu obstajajo protitelesa proti B.

Nasprotno, pri bolnikih iz skupine B najdemo antigen B, protitelesa pa anti-A.

Vendar imajo pacienti z AB kri tako antigena A kot B. Zato protiteles ni, ker bi to uničilo rdeče krvne celice te osebe.

Ravno obratno se dogaja v skupini O, kjer membrana eritrocitov ne vsebuje nobenega od obeh antigenov (niti A niti B), v serumu pa protitelesa proti A in B.

Združljivost ABO skupine

Iz zgoraj navedenega je mogoče zlahka sklepati o združljivosti krvnih skupin ABO, saj poznavanje antigena eritrocitne membrane samodejno pozna protitelesa v serumu. Torej:

- kri A je združljiva s skupino A in skupino O.

- Krvna skupina B je združljiva s krvjo B in O.

- Ljudje s skupino O lahko prejmejo samo O (ker imajo protitelesa proti A in B), čeprav njihovo kri brez težav sprejemajo vse druge skupine, saj jim primanjkuje antigenov.

- Končno. tisti, ki imajo krvno skupino AB, lahko dobijo kri iz vseh drugih skupin (A, B, O in seveda AB), saj nimajo protiteles proti nobenemu od antigenov. Vendar pa lahko samo ljudje iz skupine AB prejmejo kri AB, saj imajo vse druge skupine protitelesa, ki bi uničila te rdeče krvne celice.

Manjši antigeni

Tako kot skupine ABO lahko tudi na površini eritrocitov najdemo vrsto beljakovin, ki delujejo kot antigeni enako kot antigene skupine ABO.

Vendar ti antigeni niso prisotni pri vseh posameznikih. Njihova kombinacija je raznolika in penetrantnost (nivo ekspresije beljakovin) je spremenljiva, zato je razvrstitev v skupine, kot je tista za ABO in Rh, nemogoča. Tu je svoje ime dobila po "manjših antigenih", znanih tudi kot "antigeni z majhno pojavnostjo."

Čeprav niso pogoste, lahko obstajajo naravna protitelesa proti manjšim antigenom. Med njimi so najpogostejši Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb in Kidd. Vsi so odgovorni za zelo resne hemolitične in posttransfuzijske reakcije.

Poleg tega lahko pride do občutljivosti na manjše antigene pri predhodnem stiku bodisi z omenjenimi antigenimi proteini zaradi predhodnih transfuzij bodisi zaradi navzkrižne imunosti.

Križna imuniteta

Govori se, da obstaja navzkrižna imunost, ko sta si dva antigena iz dveh različnih virov (na primer rdeča krvna celica in bakterija) zelo podobna, do te mere, da protitelesa proti enemu od teh antigenih proteinov reagirajo tudi z drugim, ker so skoraj identična .

Da bi to bolje razumeli, vzemite prejšnji hipotetični primer (antigeni iz rdečih krvnih celic in bakterije). V nobenem primeru ni naravnih protiteles, če pa je človek izpostavljen bakteriji, bo ustvaril protitelesa proti njej.

Takšna protitelesa bodo kasneje reagirala proti rdeči krvni celici, če so njegovi antigeni zelo podobni tistim iz bakterij, ki so povzročile tvorbo protiteles.

Če se to zgodi, rdečih krvnih celic s tem določenim antigenim proteinom ne moremo dati osebi, ki ima protitelesa, saj bi prišlo do zavrnitve. V tem je pomembnost navzkrižnih reakcij.

Za kaj je križanje?

Ker ni mogoče razvrstiti krvi različnih posameznikov na podlagi manjših antigenov, je edini način, da vemo, ali obstajajo protitelesa proti manjšim antigenom rdečih krvnih celic druge osebe v krvi ene osebe, s križanjem. .

V primerih, ko so prisotna protitelesa, se sproži reakcija hemolize ali aglutinacije, zato se sklene, da je bila reakcija pozitivna; to pomeni, da obstajajo protitelesa proti manjšim antigenom (čeprav ni točno znano, kateri). V nasprotnem primeru je test negativen.

Osnove

Križanj temelji na reakciji antigen-protitelo. Zato je z njimi mogoče odkriti, ali v serumu prejemnika obstajajo protitelesa proti antigenom rdečih krvnih celic darovalca (ali obratno), kar povzroča reakcijo antigen-protitelo.

Če protiteles ni, se reakcija ne pojavi in test poroča negativno. Nasprotno, če je reakcija pozitivna (med testom obstaja hemoliza ali aglutinacija), lahko sklepamo, da so protitelesa prisotna.

V tem smislu je pomembno opozoriti, da lahko pride do protiteles proti rdečim krvničkam tako v serumu darovalca kot prejemnika. Zato obstajata dve vrsti navzkrižnih reakcij.

Vrste navzkrižnih reakcij

V bolnikovem serumu lahko obstajajo protitelesa proti darovalskim eritrocitom; lahko pa se zgodi tudi obratno, to je protitelesa v darovalčevem serumu proti pacientovim rdečim krvničkam.

Zato obstajata dve vrsti križanja:

- Glavni križni krog.

- Manjši prekriž.

Obe vrsti se izvajata rutinsko v banki krvi pred transfuzijo krvnih pripravkov, saj če je kateri od testov pozitiven, obstaja veliko tveganje za transfuzijske reakcije, ki lahko ogrozijo življenje bolnika.

Večji prekriž

S tem testom se oceni, ali prejemnikov serum vsebuje protitelesa do dajalčevih rdečih krvnih celic.

Če se to zgodi, krvnih pripravkov ne moremo dajati, saj bo velika količina protiteles, ki so prisotna v pacientovi plazmi, zelo hitro uničila darodove rdeče krvne celice, kar bo povzročilo katastrofalne reakcije v prejemnikovem telesu. Te reakcije so tako hude, da so lahko smrtno nevarne.

Manjši prekriž

V tem primeru se ugotovi, ali v serumu darovalca obstajajo protitelesa proti prejemničevim rdečim krvničkam.

V tem primeru bodo protitelesa začela uničevati prejemnikove eritrocite. Ker pa je količina protiteles omejena, je reakcija manj intenzivna; čeprav je še vedno nevaren.

Faze

Večji in manjši križni del sta razdeljeni na tri faze:

- Fiziološka raztopina.

- toplotno ali inkubacijsko.

- Coombs.

V prvi fazi se rdeče krvne celice in serum pomešajo v fiziološki raztopini. Nato dodamo albumin in vzorec 30 minut inkubiramo pri 37 ° C, da končno nadaljujemo s fazo coombs.

Tehnika

Tehnika navzkrižnega krčenja je sorazmerno preprosta, saj vključuje dodajanje rdečih krvnih celic darovalca v pacientov serum (glavni križni križ), pa tudi eritrocite prejemnika v donorski serum (manjši križni ujem).

Za sprožitev reakcije antigen-protitelo v razmeroma kratkem času je treba slediti vrsti standardiziranih korakov. Spodaj so ti koraki povzeti poenostavljeno.

Pomembno je opozoriti, da je v naslednjem razdelku opisan glavni preskus združljivosti, čeprav so koraki enaki za manjši test združljivosti, vendar izmenjujejo izvor rdečih krvnih celic in seruma.

Fiziološka faza

- V epruveto dodajte 2 kapljici seruma od prejemnika (od dajalca, če gre za manjši navzkrižni spoj).

- Vzemite vzorec rdečih krvnih celic pri darovalcu (od prejemnika, če gre za manjši križni križ).

- Rdeče krvne celice speremo in centrifugiramo.

- Raztopina v raztopini med 3% in 5%.

- kapljico te raztopine položite v epruveto, ki vsebuje prejemnikov serum.

- Nežno premešajte.

- Centrifuga.

- Rezultat preberite na prikazovalni svetilki.

Toplotna faza

- Dodajte 2 kapljici 22% albumina v epruveto, v kateri je bila zaključena fiziološka faza.

- 30 minut inkubirajte pri 37 ° C.

- Centrifuga 15 sekund.

- Rezultat preberite na prikazovalni svetilki.

Coombs faza

- Vzemite celice iz epruvete in jih sperite s fiziološko raztopino.

- Odpravite supernatant.

- Dodajte dve kapljici reagenta Coombs.