MIKROSKOP TEMNEGA POLJA: ZNAČILNOSTI, DELI, FUNKCIJE - BIOLOGIJA - 2026

Mikroskop temno polje je poseben optični instrument uporablja v nekaterih laboratorijih. To je rezultat spremembe, ki je bila narejena za mikroskopsko svetlobno polje. Darkfield mikroskopijo lahko izvedemo s presvetlitvijo ali z epi-osvetlitvijo.

Prva temelji na blokiranju svetlobnih žarkov, ki dosežejo kondenzator neposredno, z uporabo naprav, ki se vmešajo, preden svetlobni žarki dosežejo kondenzator.

Mikroskop temnega polja / Treponemi, ki jih opazimo v mikroskopih s temnim poljem. Vir: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu in Patrick L McGeer

Temno polje s prepuščeno svetlobo omogoča poudarjanje struktur ob opazovanju izjemno tankih delcev. Strukture so vidne z nekaj loma ali svetlosti na temnem ozadju.

Medtem ko učinek epi osvetlitve dosežemo z vpadno ali poševno svetlobo. V tem primeru mora biti mikroskop opremljen s posebnim filtrom v obliki polmeseca.

Z vpadno razsvetljavo je za opazovane strukture značilno, da v visokem reliefu predstavljajo vizualni učinek. Ta lastnost omogoča poudarjanje robov suspendiranih delcev.

Za razliko od svetlobne mikroskopije je mikroskopska mikroskopija še posebej uporabna za vizualizacijo fresk, ki vsebujejo suspendirane delce, brez kakršnega koli obarvanja.

Vendar ima več pomanjkljivosti, vključno s tem, da ga ni mogoče uporabiti za suhe ali obarvane pripravke. Nima dobre ločljivosti. Poleg tega številčna odprtina ciljev za zagotovitev dobre slike ne sme presegati velikosti kondenzatorja.

značilnosti

Sestava mikroskopa temnega polja predstavlja pomembne spremembe glede svetlega polja, saj so osnove mikroskopov nasprotne.

Medtem ko so v svetlem polju svetlobni žarki zgoščeni tako, da prehajajo skozi vzorec neposredno, so v temnem polju žarki raztreseni, tako da do vzorca dosežejo le poševne žarke. Nato jih isti vzorec razprši in prenaša sliko k cilju.

Če bi se osredotočili na diapozitiv brez vzorca, bi opazili temen krog, saj brez vzorca ni ničesar, kar bi svetlobo razpršilo proti cilju.

Za dosego želenega učinka v vidnem polju je potrebna uporaba specifičnih kondenzatorjev, pa tudi membran, ki pomagajo pri nadzoru svetlobnih žarkov.

V temnem vidnem polju se elementi ali delci v suspenziji zdijo svetli in lomljivi, preostanek polja pa je temen, kar daje popoln kontrast.

Če se uporablja poševna ali udarna luč, se v opazovanih konstrukcijah doseže robni učinek z velikim reliefom.

Deli mikroskopa temnega polja

Vir: amazon.com

-Mehanski sistem

Cev

Gre za napravo, skozi katero slika, odsevana in povečana s ciljem, potuje, dokler ne doseže okularja ali okularja.

Mešamo

Podpora je, kjer se nahajajo različni cilji. Cilji niso določeni, jih je mogoče odstraniti. Revolver je mogoče zasukati tako, da se lahko spremeni cilj, ko ga operater potrebuje.

Makro vijak

Ta vijak se uporablja za fokusiranje vzorca, pomakne se naprej ali nazaj, da se vzorec premakne bližje ali dlje od cilja, gibanje pa je groteskno.

Mikrometerski vijak

Mikrometrski vijak se premakne naprej ali nazaj, da se vzorec premakne bližje ali dlje od cilja. Mikrometrični vijak se uporablja za zelo fine ali občutljive gibe, skoraj neopazne. Je tisti, ki doseže končni fokus.

Platen

Je podpora, kjer bo vzorec počival na toboganu. Ima osrednjo odprtino, skozi katero prehajajo svetlobni žarki. Ko se makro in mikrometrski vijaki premaknejo, stopnja poteka navzgor ali navzdol, odvisno od gibanja vijaka.

Avto

Prevoz omogoča, da se celoten vzorec prečka s ciljem. Dovoljeni premiki so naprej in nazaj in obratno ter od leve proti desni in obratno.

Držite pinceto

Ti so nameščeni na odru, izdelani so iz kovine in so namenjeni zadrževanju tobogana, da se med opazovanjem ne premika. Pomembno je, da vzorec med opazovanjem ostane nespremenjen. Pritrdilni elementi so natančno dimenzionirani za sprejem drsnika.

Roka ali ročaj

Roka spaja cev s podlago. To je kraj, kjer mora biti mikroskop, ko ga bomo premikali z ene strani na drugo. Z eno roko se prijema roka, z drugo pa drži podlago.

Podstavek ali stopalo

Kot pove že njegovo ime, je osnova ali podpora mikroskopa. Zaradi mikroskopa lahko mikroskop ostane fiksen in stabilen na ravni površini.

-Optični sistem

cilji

So valjaste oblike. Na dnu imajo lečo, ki povečuje sliko, ki prihaja iz vzorca. Cilji so lahko različnih povečav. Primer: 4,5X (povečevalno steklo), 10X, 40X in 100X (potopni cilj).

Potopni cilj je tako imenovan, ker zahteva, da se med objekt in vzorec položi nekaj kapljic olja. Druge se imenujejo suhe tarče.

Cilji so natisnjeni z lastnostmi.

Primer: blagovna znamka proizvajalca, korekcija ukrivljenosti polja, korekcija aberacije, povečava, numerična odprtina, posebne optične lastnosti, potopno gojišče, dolžina cevi, goriščna razdalja, debelina pokrova in kodni obroč barva.

Leče imajo sprednjo lečo na dnu in zadnjo lečo na vrhu.

Očala

Stari mikroskopi so monokularni, torej imajo samo en okular, sodobni mikroskopi pa daljnogled, torej imajo dva okularja.

Očesi so valjaste in votle oblike. V notranjosti imajo konvergentne leče, ki razširijo virtualno sliko, ki jo ustvari leča.

Očesnik se pridruži cevi. Slednje omogoča, da slika, ki jo posreduje cilj, doseže okular, kar ga bo spet povečalo.

Očesnik v svojem zgornjem delu vsebuje lečo, imenovano okular, v spodnjem delu pa leča, imenovana kolektor.

Ima tudi diafragmo in glede na to, kje se nahaja, bo imelo ime. Tisti, ki se nahajajo med obema lečama, se imenuje Huygens okular in če se nahaja po dveh lečah, se imenuje Ramsden okular. Čeprav je še veliko drugih.

Povečava okularja se giblje med 5X, 10X, 15X ali 20X, odvisno od mikroskopa.

Uporabnik si lahko s pomočjo okularja ali okularja ogleda vzorec. Nekateri modeli so opremljeni z obročem na levem okularju, ki je premičen in omogoča prilagajanje slike. Ta nastavljiv obroč se imenuje dioptrijski obroč.

-Svetilni sistem

Svetilka

Je vir osvetlitve in se nahaja na dnu mikroskopa. Svetloba je halogenska in se oddaja od spodaj navzgor. Na splošno je svetilka, ki jo imajo mikroskopi, 12 V.

Diafragma

Diafragma mikroskopov s temnim poljem nima šarenice; v tem primeru to preprečuje, da bi žarki, ki prihajajo iz žarnice, neposredno dosegli vzorec, le poševni žarki se bodo dotikali vzorca. Tisti prameni, ki jih razpršijo strukture, prisotne v vzorcu, so tiste, ki bodo prešle cilj.

To pojasnjuje, zakaj so strukture videti temne in svetleče v temnem polju.

Kondenzator

Kondenzator mikroskopa temnega polja se razlikuje od svetlega polja.

Obstajata dve vrsti: lomljivi kondenzatorji in odsevni kondenzatorji. Slednji je razdeljen na dve kategoriji: paraboloide in kardioide.

Preponski kondenzatorji

Ta vrsta kondenzatorja ima disk, ki je nameščen za lom svetlobe, lahko se nahaja nad sprednjo lečo ali na zadnji strani.

Kondenzatorja te vrste je zelo enostavno improvizirati, saj je dovolj, da pred sprednjo lečo kondenzatorja postavite disk iz črnega kartona, ki je manjši od leče (membrana).

Mikroskop s svetlim poljem se lahko s tem nasvetom pretvori v mikroskop temnega polja.

Odsevni kondenzatorji

So tisti, ki jih uporabljajo stereoskopski mikroskopi. Obstajata dve vrsti: paraboloidi in kardioidi.

• Paraboloidi: imajo vrsto ukrivljenosti, imenovano paraboloidi zaradi svoje podobnosti s parabolo. Ta vrsta kondenzatorja se pogosto uporablja pri preučevanju sifilisa, saj omogoča opazovanje Treponemov.
• Kardioid : ukrivljenost kondenzatorja je podobna srcu, od tod tudi ime "kardioid", istoimenski kondenzator. Ima membrano, ki je nastavljiva.

Lastnosti

- Uporablja se za raziskovanje prisotnosti Treponema pallidum v kliničnih vzorcih.

-Koristno je tudi opazovanje Borrelias in Leptospiras.

-To je idealno za opazovanje in vivo vedenja celic ali mikroorganizmov, če ni treba podrobno opisovati določenih struktur.

-Odlično je poudariti kapsulo ali steno mikroorganizmov.

Prednost

-Temski poljski mikroskopi z lomljivim kondenzatorjem so cenejši.

-Uporaba je zelo koristna pri povečavi 40X.

-Odlični so za opazovanje vzorcev, ki imajo lomni indeks, podoben mediju, na katerem so. Na primer celice v kulturi, kvasovke ali gibljive bakterije, kot so spiroheti (Borrelias, Leptospiras in Treponemas).

-Celico lahko opazimo in vivo, kar omogoča oceno njenega vedenja. Na primer Brownovo gibanje, gibanje flagelov, gibanje z oddajanjem psevdopodov, postopek mitotične delitve, izločanje ličink, brstijo kvasovke, fagocitoza, med drugim.

-Omogoča poudarjanje robov struktur, na primer kapsule in celične stene.

- Možno je analizirati razčlenjene delce.

-Uporaba barvil ni potrebna.

Slabosti

- Pri montaži pripravkov je treba biti še posebej pozoren, saj če so preveč debeli, jih ne bomo dobro opazili.

-Ločljivost slik je nizka.

- Temni poljski mikroskopi, ki uporabljajo refrakcijske kondenzatorje, imajo zelo nizek odstotek svetilnosti.

-Za izboljšanje kakovosti slike s potopnim ciljem (100X) je potrebno zmanjšati številčno zaslonko ciljev in s tem povečati kakovost osvetljevalnega stožca. Za to je bistvenega pomena vključitev dodatne membrane, ki lahko uravnava številčno odprtino cilja.

- Suhih ali barvnih pripravkov ne morete vizualizirati, razen če so vitalna barvila.

-Ne omogoča vizualizacije nekaterih struktur, zlasti notranjih.

- Temni mikroskopi so dražji.

Reference

1. "Mikroskop s temnim poljem." Wikipedija, prosta enciklopedija. 26. avgust 2018, 00:18 UTC 30. junij 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnoza leptospiroze iz vzorcev krvi in ​​kulture z opazovanjem pod mikroskopom temnega polja. Biomedicinska. 2008; 28 (1): 7-9 Dostopno na: scielo.org
3. Rodríguez F. Vrste optičnih mikroskopov. Blog kliničnega in biomedicinskega laboratorija. Dostopno na: franrzmn.com
4. Sodelavci Wikipedije. Mikroskopija s temnim poljem. Wikipedija, prosta enciklopedija. 19. oktober 2018, 00.13 UTC. Dostopno na: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Ocena mikroskopije na temnem polju, kulture in komercialnih seroloških kompletov pri diagnozi leptospiroze. Indijski J Med Microbiol. 2015; 33 (3): 416–21. Na voljo v: nlm.nih.gov