- značilnosti
- Razlike med kulturnimi in obogatitvenimi mediji
- Obogatene vrste in uporabe agarjev
- - Krvni agar
- Baza hranilnega agarja
- Osnova agarne osnove za možgansko infuzijo srca
- Trypticasein baza sojinega agarja
- Agar baza Müeller Hinton
- Thayer Martin Agar Base
- Columbia agar baza
- Osnova agarjev Brucella
- Osnova agarja Campylobacter
- - Čokoladni agar
- Columbia agar baza
- GC baza agar baze
- Agar baza Müeller Hinton
- Baza z agarjem Thayerja Martina
- Reference
Obogateno gojišče sestoji iz kombinacije hranilnem agarju kot baze plus obogateni snov ali snovi. Obogatena medijska par excellence sta krvni agar in čokoladni agar.
Oba medija lahko med drugim pripravimo s preprosto bazo katerega koli hranilnega agarja, kot so hranilni agar, triptikasein sojin agar ali agar z možganskim infuzijskim srcem. Prav tako sta oba medija dopolnjena z zelo obogatenim elementom, ki je kri, s to razliko, da se v prvem primeru uporablja defibrinirano, v drugem primeru pa segreva.
Dve ploščici krvnega agarja (obogateno gojišče), ki prikazujeta beta-hemolizo. Vir: Pixabay.com
Ti mediji ne vsebujejo zaviralcev, zato lahko na njih raste veliko različnih mikroorganizmov, vključno z nekaterimi prehransko zahtevnimi sevi. V tistih primerih, ki so že izjemno zahtevni, poleg krvi potrebujejo še druge posebne prehranske dodatke, ki jih je treba dodati mediju, v katerem naj bi se izolirali.
Po drugi strani pa če obogatenemu mediju dodamo antibiotike ali druge zaviralne snovi, ta takoj postane selektivno obogateno gojišče. Slednji so potrebni, ko poskušate izolirati zelo zahtevne mikroorganizme z območja, bogatega z mikrobioto, kot sta Haemophilus sp in Neisseria meningitidis, izolirani iz vzorca nazofaringealnega eksudata.
značilnosti
Ti mediji imajo prehransko bazo, ki jo sestavljajo peptoni, izvlečki kvasa, prebavi trebušne slinavke in včasih glukoza. Vsebuje tudi snovi, ki uravnotežijo pH, vodo in agar-agar.
Po drugi strani pa lahko dodamo defibrinirano ali segreto kri in vključimo posebne dejavnike rasti, kot so: vitaminski kompleksi, biotin, para-amino benzojeva kislina, hemin, NAD.
Razlike med kulturnimi in obogatitvenimi mediji
Pomembno je, da obogatenih kulturnih medijev ne bi smeli zamenjati z obogatenimi mediji. Čeprav oba vsebujeta posebna hranila in prehranske potrebe, so obogatitveni mediji tekoči in se uporabljajo kot predobdelava vzorcev, pri katerih obstaja sum na prisotnost vrste patogenih bakterij, ki jih v manjši meri najdemo znotraj polimikrobne mešanice.
Sredstvo za obogatitev bo zaviralo mikroorganizme, ki ne spadajo v to skupino, in bo spodbujalo rast patogena.
Poleg tega imajo lastnost popravljanja škode na celični strukturi mikroorganizma, ki jo je treba obnoviti, saj lahko nanjo običajno vplivajo prejšnja prejeta zdravljenja in v tem smislu medij deluje tako, da poveča svojo sposobnost preživetja.
Obogatene vrste in uporabe agarjev
Najpogosteje uporabljeni obogateni agar je krvni agar, vendar ga lahko pripravimo z različnimi prehranskimi osnovami in odvisno od tega se njegova uporabnost spreminja.
Po drugi strani pa obstaja tudi čokoladni agar, ki je obogatena srednja par excellence. Vendar pa ga lahko, podobno kot krvni agar, pripravimo z različnimi prehranskimi osnovami, poleg tega, da vključujemo druge aditive za izolacijo hitrih mikroorganizmov.
Spodaj je povzetek najpogosteje uporabljenih agarnih podlag za pripravo krvnega agarja in čokoladnega agarja ter njihova uporabnost v vsakem primeru.
- Krvni agar
Gojenje na krvnem agarju fakultativne anaerobne bakterije Morganella morganii. Vzeto in urejeno iz: Bakterije v fotografijah.
Pripravljeno z:
Baza hranilnega agarja
Uporablja se za nezahtevne bakterije, kot so: Enterobacteriaceae, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp. Ni primeren za tako močne bakterije, kot je Streptococcus.
Osnova agarne osnove za možgansko infuzijo srca
Krvni agar s to bazo je odličen za večino bakterij, vključno s Streptococcus sp, vendar ga ne priporočamo za opazovanje vzorcev hemolize. Ta kombinacija z določenimi dodatki je koristna za nekatere mikroorganizme. Primeri:
Če se temu medu dodata cistin in glukoza, se uporablja za izolacijo Francisella tularensis. Če je dodan cistinski telurit, je koristno izolirati Corynebacterium diphteriae.
Prav tako se ta medij uporablja za izolacijo bakterij iz rodu Haemophilus, v tem primeru pa je treba dodati bakitracin, koruzni škrob, konjsko kri in druge dodatke za obogatitev, kot je (IsoVitaleX).
Nazadnje, če je vključen v njegovo pripravo (kloramfenikol - gentamicin) ali (penicilin - streptomicin) s konjsko krvjo, je idealen za izolacijo Histoplasma capsulatum.
Trypticasein baza sojinega agarja
Odličen je za pospeševanje rasti najrazličnejših mikroorganizmov, vključno s Streptococcus sp, ki so najbolj priporočljivi za opazovanje vzorcev hemolize.
Če ga dopolnjujejo cistinski telurit in jagnjetina kri, je idealen za Corynebacterium diphteriae.
Agar baza Müeller Hinton
Idealno za antibiotike zapletenih mikroorganizmov, kot je Streptococcus sp, kot tudi za izolacijo Legionella pneumophila.
Thayer Martin Agar Base
Idealen je za izolacijo vrste Neisseria meningitidis.
Columbia agar baza
Poseben je za izolacijo bakterij Helicobacter pylori in Gardnerella vaginalis. Za večji uspeh se dodajo različne vrste antibiotikov, ki zavirajo spremljajočo mikrobioto.
Osnova agarjev Brucella
Kombinacija jagnječje krvi, vitamina K in agruma Brucella je odlična za gojenje anaerobnih bakterij.
Osnova agarja Campylobacter
Kot že ime pove, se ta podlaga uporablja za izolacijo Campylobacter jejuni v vzorcih blata. Za to jo dopolnimo s 5% ovčje krvi in cefalotinom, amfotericinom B, trimetoprimom, polimiksinom B in vankomicinom.
- Čokoladni agar
Čokoladni agar
Pripravljeno z:
Columbia agar baza
Priprava čokoladnega agarja s to osnovo se pogosto uporablja za izolacijo bakterij iz rodu Neisseria.
Priporočljivo je tudi za izolacijo Brucella sp, vendar je za to treba dodati vitamin K in uporabiti konjsko kri.
GC baza agar baze
To je ena od priporočenih podlag za izdelavo čokoladnega agarja, zlasti za izolacijo gonokokov.
Agar baza Müeller Hinton
Nekateri hitri mikroorganizmi, kot je Streptococcus pneumoniae, potrebujejo ta medij, da lahko opravi test za protimikrobno občutljivost.
Uporabna je tudi pri izolaciji Neisserias in Haemophilus, le da rod Haemophilus daje prednost konjski krvi, saj je bogat s faktorjem X (hemin) in V (NAD).
Včasih je priporočljivo, da v njegovo pripravo vključimo antibiotike, da zaviramo spremljajočo mikrobioto.
Baza z agarjem Thayerja Martina
Za pripravo čokoladnega agarja s to osnovo priporočamo uporabo jagnječje krvi. Ta medij je poseben za izolacijo bakterije Neisseria gonorrhoeae. Dodajo se antibiotiki, da zavirajo spremljajočo mikrobioto.
Čokoladni agar (obogaten kulturni medij): Vir: Pixinio.com
Reference
- Prescott M, Harley P, Klein A. Mikrobiologija, 4. Uvodnik McGraw-Hill Interamericana, 2003, Madrid, Španija, str. 105–108.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 izd. Argentina. Uredništvo Panamericana SA
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. (5. izd.). Argentina, uredništvo Panamericana SA
- Jawetz E, Melnick J, Adelberg E. (1992). Medicinska mikrobiologija. (14 ta izdaja) Mehika, uredništvo El Manual Moderno.
- González M, González N. 2011. Priročnik medicinske mikrobiologije. 2. izdaja, Venezuela: Direktorat za medije in publikacije Univerze v Carabobu.