KRVNA KULTURA: ZA KAJ GRE, UTEMELJITEV, POSTOPEK, REZULTATE - BIOLOGIJA - 2026

Kultura krvi je bakteriološki test, ki si prizadeva za ugotavljanje prisotnosti mikroorganizmov v krvi. Kri je po naravi sterilna tekočina, zato jo je treba hraniti v fizioloških pogojih, zato je prisotnost bakterij ali gliv v krvi vedno patološka.

Ko se v krvi nahajajo bakterije ali glive, vendar razmnoževanje ne presega izločanja mikroorganizmov s strani imunskega sistema, se imenuje bakteremija (za bakterije) ali fungemija (za glive); Če pa se mikroorganizmi v številu nenadzorovano povečajo, se imenuje septikemija.

Stekleničke s krvnimi kulturami (rumena: otroška aerobioza, zelena: aerobioza pri odraslih in rdeča: anaerobioza odraslih). Vir: fotografija, ki jo je posnela avtorica mag. Marielsa Gil.

Baktermijemija, glikemija in septikemija ogrožajo življenje bolnika, zato jih je treba takoj zdraviti. Zato zdravniki, kadar obstaja sum okužbe v krvi, zahtevajo študijo krvne kulture.

Ta bakteriološka analiza omogoča vedeti, ali v krvi obstaja okužba in kateri mikroorganizem je vpleten. Če je pozitiven, se opravi test občutljivosti, da se ve, kateri antibiotik ali protiglivično zdravilo lahko uporabimo pri zdravljenju.

Če je krvna kultura po 24 urah inkubacije negativna, je ne smemo zavreči, dokler ne mine 240 ur. To zagotavlja, da ne obstajajo počasi rastoči mikroorganizmi.

Da bi bila krvna kultura zanesljiva, je treba med odvzemom vzorca sprejeti skrajne aseptične ukrepe in za povečanje zanesljivosti in občutljivosti testa je treba med ali v času najvišje vročine vzeti najmanj dva vzorca.

Za kaj gre?

Kri je sterilna tekočina in ko so v njej mikroorganizmi, je 100% patološka. Ta položaj predstavlja zelo občutljivo klinično sliko, ki ogroža življenje pacienta.

Krvna kultura je pomemben bakteriološki test, ki odkrije prisotnost mikroorganizmov v krvnem obtoku.

Mikroorganizmi lahko pridejo do krvi po različnih poteh, kar bi lahko bile med drugim tudi ožilne okužbe, kot so: pljučnica, vnetje trebuha, pielonefritis, resne kožne okužbe, mehka tkiva ali artritis.

Lahko pa tudi intravensko, na primer kontaminacija intravenskih ali arterijskih katetrov, endokarditis, intravenska odvisnost od drog, dajanje onesnaženih zdravil ali raztopin itd.

Pravočasno odkrivanje in zdravljenje povzročitelja sepse je nujno za preživetje bolnika.

V tem smislu mora zdravnik navesti realizacijo krvne kulture, ko opazuje znake in simptome, zaradi katerih obstaja sum na septikemijo, na primer: vročina (večja od 38 ° C) brez očitnega infekcijskega žarišča ali, nasprotno, hipotermija (<de 36 ° C).

Drugi znaki so lahko: mrzlica, povečano število belih krvnih celic (> 10.000 celic / mm ³ ) ali znatno zmanjšanje polimorfonuklearnih celic (<1.000 PMN / mm ³ ). Kot tudi nenadno poslabšanje multiorgana ali izguba vitalnosti, med drugimi opozorilnimi znaki.

Baktermija je lahko konstantna, prehodna ali občasna. To je pomembno pri odvzemu vzorca, saj ga je treba vzeti, kadar obstaja večja verjetnost, da bo mikroorganizem krožil.

Zato je priporočljivo odvzeti vsaj 2 vzorca na različnih mestih. Poleg tega je idealno, da se vzorec odvzame v vročinskih konicah ali kadar bolnik predstavlja drhtenje, ekstremno hipotermijo, potenje ali tahikardijo.

Da pa je krvna kultura resnično uporabno orodje, je treba vzorec jemati zelo previdno. Slaba manipulacija ali slaba asepsija v trenutku odvzema vzorca lahko razveljavi test in dobi napačne pozitivne rezultate.

Osnove

Študija je sestavljena iz odvzema dveh ali treh vzorcev krvi aseptično in dajanja v posebne steklenice.

Posebne naprave za gojenje vzorcev krvi se imenujejo steklenice krvi. Te so razvrščene v:

Glede na starost pacienta

-Pediatrična uporaba

-Za odrasle.

Glede na vrsto mikroorganizma

- bučke za aerobne mikroorganizme (aerobne bakterije, fakultativne bakterije in glive).

- Stekleničke s krvno kulturo za anaerobne mikroorganizme (stroge anaerobne bakterije).

Nekateri vsebujejo tekoče gojišče, nekateri pa trdno in tekoče gojišče hkrati. Obstajajo tudi z delci aktivnega oglja.

Proces

Priporočila za vzorčenje

- Vzorec, ki ga bo odvzel visoko usposobljeno in usposobljeno osebje na področju mikrobiologije.

- Asepsija ali temeljito čiščenje mesta za odvzem vzorcev je nedvomno najpomembnejši korak.

- Kot vse vzorčenje mora zdravstveno osebje med postopkom v celoti upoštevati ukrepe za biološko varnost (med drugim uporabo rokavic, oblek, očal).

- Pazite, da so na voljo vsi potrebni pripomočki za odvzem vzorcev.

- Viale označite s polnim imenom, datumom, številko zdravstvenega kartona, časom odvzema vzorca in zaporedno številko laboratorija.

-Idealno je, da vzamemo vzorec, preden bolnik začne antimikrobno zdravljenje. Navedeno je le v primeru suma na neučinkovitost zdravljenja v teku. V tem primeru je treba vzorec odvzeti pred spremembo zdravila in uporabiti steklenice krvne kulture z zaviralci antibiotikov (delci aktivnega oglja).

- Na različnih anatomskih mestih, kot sta desna in leva roka, je treba odvzeti vsaj 2 vzorca. Pri sumu na endokarditis priporočamo 3 vzorce. V vsak vzorec bosta vključeni dve steklenički (ena za aerobiozo in ena za anaerobiozo).

Količina vzorca

Količina vzorca se razlikuje glede na starost pacienta, vendar je treba glede na redčenje krvne / kulturne juhe vedno vzdrževati razmerje 1: 5 do 1:10.

Pri novorojenčkih je priporočena količina vzorca 1 ml krvi na vialo. Uporablja se otroška steklenica.

Pri dojenčkih med enim mesecem in enim letom se lahko poveča na 1,5 ml krvi na stekleničko. Uporablja se otroška steklenica.

Pri otrocih, starejših od 2 let, je ustrezna količina vzorca 2,5 ml krvi na vialo. Uporablja se otroška steklenica.

Od adolescence se lahko poveča na količino krvi med 5 - 10 ml na steklenico. Uporablja se steklenica za odrasle.

Končno je v fazi za odrasle potrebna količina 8-10 ml na steklenico. Uporablja se steklenica za odrasle.

Vzorčenje

- Vzorec krvi je lahko venski ali arterijski. Vendar se arterijska kri odvzame le, kadar je vzorčenje ven nemogoče.

- Odvzem vzorca iz centralnega venskega katetra ni priporočljivo, razen če:

1. Vzorca ni mogoče odvzeti periferno (vensko ali arterijsko).
2. Bolniki, ki jim grozi krvavitev.
3. Ko zdravnik sumi na bakteremijo zaradi kontaminacije centralnega venskega katetra.
4. Ko se po vročinski ukinitvi od 4 do 5 dni vročina ponovno pojavi, ne glede na to, ali je bolnik na antimikrobnem zdravljenju ali ne.

Asepsa pred vzorčenjem

- Izberite anatomska mesta za vzorčenje. Na splošno so izbrane žile najboljšega kalibra (bazilika ali cefalična vena).

- Po podatkih Centrov za nadzor bolezni (CDC) v Atlanti (ZDA) si mora upravljavec pred vzorčenjem poleg nosilnih rokavic umiti roke z 2% klorheksidinom ali 10% povidonskim jodom.

-Palpalizirajte in poiščite žilo, ki jo želite uporabiti.

-Vrtljivo očistite območje predrtja, s premikom klorheksidina ali antiseptičnega mila od središča navzven. Izperite s sterilno fiziološko raztopino.

Nato nanesite antiseptik in pustite, da deluje. Primer klorheksidin glukonata 0,5% za 1 minuto ali povidon jod 10% 2 minuti. Pri slednjem najprej vprašajte, ali je bolnik alergičen na jod. Če ste alergični, lahko nadomestite 70-odstotni alkohol.

Odvzem vzorca

- Postavite vodnik, da povečate pretok krvi in ​​poženete žilo.

- Na mesto punkcije se s prstom ne dotikajte več. Če je to nujno potrebno, je treba prst umiti na enak način kot predel punkcije.

- Vstavite injekcijsko iglo ali lasišče v žilo in odvzemite potrebno količino krvi.

-Ne odstranjujte bombaža ali gaze na iglo, če ni sterilna.

-Zaščitni pečat odstranite iz steklenic zelo previdno in brez dotika pokrova. Nekateri avtorji priporočajo izvedbo dezinfekcije pokrovčka pred cepljenjem vzorca.

- Razdelite ustrezno količino krvi v vialah. Če se vzorec odvzame z injektorjem, se potrebna količina najprej vlije v anaerobno bučko in nato v aerobno bučko. Če jemljemo lasišče (metulj), ga vlijemo na nasproten način.

- Stekleničko s kulturo krvi nežno premešajte z inverzijo.

- Zamenjajte rokavice in ponovite prejšnje korake za odvzem drugega vzorca.

-Če je drugi vzorec odvzet z drugega mesta, ga je mogoče storiti takoj, če pa je z istega mesta, morate med enim vzorcem in drugim počakati 30 do 90 minut.

- Vzorec je treba čim prej odnesti v laboratorij, če to ni mogoče, ga je treba pustiti pri sobni temperaturi do 18 ur.

Kultura

Ko so bučke v laboratoriju, se inkubirajo pri 37 ° C pod pogoji vsake bučke, torej v aerobiozi oziroma anaerobiozi.

Po ročni metodi je treba zvonjenje začeti ob 24 urah inkubacije in nato meddnevno zvonjenje. Obroči se izvajajo na naslednji način: najprej se razkuži pokrov steklenice in se vstavi igla sterilnega injektorja. Tekočina se ekstrahira iz bučke in seja na krvni agar in čokoladni agar.

Če pride do rasti, se opravi Gram, subkulture v posebnih medijih, biokemijski testi in antibiogram.

Pri avtomatiziranih metodah oprema Bact / Alert sproži alarm, ko zazna, da je viala pozitivna. Na enak način ga je treba prisloniti na krvni agar in čokoladni agar.

Druga metoda, ki postaja vedno bolj priljubljena, je analiza bučke po 6 urah inkubacije z masno spektrometrijo. Ta metoda je pomagala povečati občutljivost in hitrost diagnoze.

Rezultati

Dokler je steklenica krvne kulture negativna, lahko lečeči zdravnik predloži predhodna vmesna poročila. Poročilo kaže, da je v urah, ki jih je inkubiral, negativen. Na primer, če gre do negativnega do četrtega dne, se bo poročalo na naslednji način:

Predhodni rezultat: negativna kultura pri 96 urah inkubacije.

Opomba: študija se nadaljuje 240 ur.

Če je krvna kultura pozitivna, se nemudoma obvesti lečeči zdravnik in pošlje poročilo z vsaj gramom kolonije. Primer:

Predhodni rezultat: pri 48-urni inkubaciji pri pozitivni kulturi opazimo gram negativne bacile in negativno oksidazo. Identifikacija in testiranje občutljivosti je v teku.

Te informacije usmerjajo zdravnika, da začne empirično terapijo proti morebitnemu mikroorganizmu, medtem ko čaka na končni rezultat laboratorija.

Po zaključku bakteriološke študije, torej da je mikroorganizem identificiran in antibiogram na voljo, je treba končno poročilo poslati čim prej.

Posebno paziti je treba, če je ciljni mikroorganizem Neisseria gonorrhoeae ali Neisseria meningitidis, saj te bakterije inhibirajo v prisotnosti visokih koncentracij natrijevega polianetosulfonata (SPS).

Zato ta spojina ne sme presegati 0,025% v steklenicah s krvnimi kulturami.

Po drugi strani pa, če se vzorec krvne kulture najprej odvzame v epruvetah za sesanje, imajo te epruvete koncentracije SPS, strupene za meningokoke in gonokoke, zato je treba kri v roku 1 ure prenesti v sistem za gojenje juhe.

Kako ugotoviti, ali je krvna kultura pozitivna ali je kontaminacija

Šteje se, da je krvna kultura kontaminirana, kadar je rast odvzeta samo v eni viali s krvno kulturo. In sum o kontaminaciji se poveča, če je izolirani mikroorganizem normalna kožna mikrobiota: primer: koagulazno negativen stafilokok, Propionibacterium spp, med drugimi.

Vendar pri bolnikih z oslabljenim imunskim sistemom ne smemo zanemariti nobenega mikroorganizma, v tem primeru pa se mora mikroorganizem pojaviti v več vzorcih.

Po drugi strani pa je, če je občutljivost na antibiotike istega mikroorganizma, izoliranih v dveh različnih vzorcih, enaka, okužba resnična.

Druga značilnost je bakterijska obremenitev, saj kontaminirane krvne kulture rastejo pozno, resnične okužbe pri nezdravljenih pacientih pa so običajno 14 ur inkubacije, ko mikroorganizem ne moti.

Po drugi strani pa lahko pri bolnikih, ki se zdravijo z antimikrobnimi zdravili, potreben čas, da raste, ker je obremenitev zelo majhna.

Pojav več kot enega mikroorganizma lahko kaže na kontaminacijo, če pa se isti rezultat ponovi v več posnetkih z različnih mest, potem je resničen.

Reference

1. "Krvna kultura." Wikipedija, prosta enciklopedija. 3. julij 2019, 17:28 UTC 14. julij 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Nove tehnologije v mikrobiološki diagnostiki: avtomatizacija in nekatere aplikacije v mikrobiološki identifikaciji in študiji občutljivosti. Rev. Med. Klinike. Šteje. 2015; 26 (6) 753–763. Dostopno na: bralec.elsevier.com
3. Villarroel P. Poglavje 20: Sepsa in tveganje za bolezni srca in ožilja. Zdravje srca in ožilja. pp 187-194. Dostopno na: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Krvne kulture: Kaj so vam povedali in kaj počnete? Bolni glob. 2012; 11 (26): 146–163. Dostopno na: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Verjetnost uspešnosti pridobitve pozitivne krvne kulture. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28–40. Dostopno na: scielo.org