BAKTERIOLOŠKA ZANKA: ZNAČILNOSTI, VRSTE, UPORABE - BIOLOGIJA - 2025

Bakteriološko zanka je delovno orodje z mikrobiologov uporablja za setev mikrobnih kultur (bakterije ali glivice). To je morda instrument, ki ga ti strokovnjaki najbolj uporabljajo.

Njegova uporaba se zdi preprosta, v resnici pa zahteva veliko treninga. Pred začetkom setve je treba zanko sterilizirati v Bunsenovem gorilniku, nato pa se odvzame mikrobni inokulum, ki lahko izhaja iz tekoče kulture ali trdne kulture.

Vrste bakterioloških zank. Vir: Avtor ni na voljo za branje avtorja. お や お domneva (temelji na trditvah o avtorskih pravicah).

Ko je inokulum odvzet, ga lahko odložimo v tekoči medij ali sejemo v trden medij. Po vsakem postopku se zanka ponovno sterilizira. Ročaj je primeren tudi za izdelavo mikrobnih razmazov na diapozitivu.

Bakteriološka zanka ima veliko imen, med njimi: platinasta zanka ali zanka, inokulacijska zanka ali semenska zanka, vendar je njeno pravo ime Kohlejeva zanka.

Material, iz katerega je izdelan ročaj, je na splošno nikljevo-kromova (nikromova) zlitina ali platina. Druga sorta, ki je na voljo na trgu, so plastične bakteriološke zanke za enkratno uporabo.

Po drugi strani obstaja več vrst bakterioloških zank, vsaka pa izpolni funkcijo v okviru nalog, ki jih izvaja mikrobiolog. Izbira ročaja bo odvisna od tega, kaj je treba storiti.

Na primer za izvedbo striatuma z izčrpavanjem, da bi izolirali mikroorganizem, uporabimo platinasto zanko, ki se konča v zaprtem obroču, ne glede na to, ali je umerjena ali ne.

Če je treba sejati vzorec urina, kjer je pomembno količinsko določiti CFU, je treba uporabiti umerjeno zanko. Prav tako je za cepljenje biokemijskih testov, ki jih je treba posejati s punkcijo, ključna zanka. Pomembno je, da z ročajem ravna usposobljeno osebje.

značilnosti

Bakteriološke zanke so sestavljene iz dveh skrajnosti. En konec ustreza ročaju ali podstavku, drugi pa je sam ročaj.

Ročaj podstavka ali ročaja

Podstavek služi za prijemanje ročaja med rokovanjem. Običajno je kovinski, vendar ima toplotni izolator, ki prepreči gorečju, da se konica ročaja sterilizira na vžigalniku. Meri približno 20 cm, čeprav je lahko tudi dlje. Ima nit za nastavitev ročaja.

Ročaj

Je funkcionalni konec, to je tisti del, ki pride v stik z mikroorganizmi in s kulturo. Sestavljen je iz fine žice, ki je vstavljena v podlago.

Ročaj je lahko iz nikroma ali platine, zato ga včasih imenujemo platinast ročaj. Dolga je približno 6,5 cm in ima približno 0,20 mm. Ročaj z ročajem lahko meri 26,5 cm. Meritve se lahko razlikujejo od proizvajalca do proizvajalca.

Vrste

Obstaja več vrst bakterioloških zank in vsaka ima posebno uporabo. Vrste ročajev so naslednje: kalibrirani ročaji v obliki obroča, nekalibrirani ročaji v obliki obroča, naravnost ali ročaj z iglo, ročaj z lopatico, ročaj v obliki črke L in ročaj z ostrim vrhom.

Po drugi strani so ročaji lahko trajni ali za enkratno uporabo. Tisti za stalno uporabo se sterilizirajo v vžigalniku, so za večkratno uporabo in zelo trpežni. Medtem ko so tovarniški materiali za enkratno uporabo sterilni, jih uporabljamo le enkrat in jih zavržemo.

Prijave

Ročaj obroča, ni umerjen

Je najbolj uporabljen ročaj v mikrobiološkem laboratoriju. Uporablja se za odvzem inokuluma iz mikrobne suspenzije (tekoči medij) ali dela kolonije (trden medij), ki ga je treba posejati v drug gojiščni medij, bodisi biokemijski test ali bolj obogateno ali selektivno gojišče, odvisno od primera. Koristna je tudi za izdelavo mikrobnih razmazov na diapozitivu.

S to vrsto zanke je mogoče začetni inoculum progasti. Zasnovan je tudi tako, da gladko drsi po agarju, ne da bi pri tem poškodoval. Seveda je za to potrebno usposobljeno osebje za ravnanje s tehniko sejanja, s pravilno silo in gibi, da se dobro stori.

S tem ročajem lahko izvajamo različne tehnike sejanja. Primer, trdni mediji v Petrijevih posodah se navadno sejejo zaradi izčrpanosti (obstaja več tehnik, glej video 1).

Ta tehnika je namenjena pridobivanju izoliranih kolonij, da bi jih preučevali in identificirali, zlasti kadar je vzorec polimikroben, torej kultura ni čista (vsebuje več kot eno vrsto mikroorganizmov).

Namesto tega so klini zasajeni v preprostem cikcaku, da dobijo bakterijsko maso, v tem primeru pa ni treba izolirati kolonij.

Včasih se uporabljajo tudi za odvzem določenih vzorcev. Rojas et al. So na primer uporabili bakteriološko zanko za zbiranje strganih vzorcev vaginalnega tkiva pri podganah.

Bakteriološka zanka s konico obroča, ni umerjena. Vir: Pixinio.com

Ročaj v obliki obroča, umerjen

Ta ročaj, kot pove že njegovo ime, je umerjen tako, da vzame določeno količino mikrobne suspenzije. Uporablja se, kadar je inokulum potreben, da ustreza temu, kar je standardizirano v tehniki.

Na primer, zelo pogosto je za sajenje urinskih kultur. V tem primeru lahko uporabimo kalibrirano zanko 0,01 ml in 0,001 ml.

Treba je opozoriti, da imajo kalibrirani ročaji napak, ki se razlikuje glede na kot, s katerim se vzame vzorec, in velikost ustja posode.

Če zanko 0,001 ml vstavite navpično v posodo z majhnimi ustji (≤ 7 mm), bo vzeta količina za 50% manjša od želene.

Do tega pride, ker manjši je premer ustja posode, večja je površinska napetost in zato se sile adhezije med (steklo - tekočina) povečajo. Zaradi tega je tekočinski naboj, ki ga vzame ročaj, manjši.

Ker lahko vzamemo pod kotom 45 ° v posodi s širokim ustjem (≥ 22 mm), lahko zberemo 150% več od potrebne količine. V tem primeru je površinska napetost nižja in kohezijske sile steklo / plastika se zmanjšajo, kohezijska sila tekočina-tekočina pa narašča.

Zaradi navedenega so za urinske kulture včasih prednostne druge metode za količinsko določitev enot, ki tvorijo kolonije.

Raven ali igelni ročaj

Imenuje se tudi ročaj z nitmi. Uporablja se za inokulacijo nekaterih biokemijskih testov, zlasti tistih, ki jih je treba sejati s tehniko punkcije. Primer poltrdnih medijev, ki so pripravljeni v obliki bloka, na primer: medij SIM, MIO in O / F.

Poleg tega je v primeru MIO in SIM, ki ocenjujejo gibljivost, nujno, da se punkcija izvede z igličnim zankom, saj se interpretacija pozitivne gibljivosti pojavi, ko bakterije rastejo ob straneh začetnega inokuluma.

Test, inokuliran z zanko v obliki zanke, lahko ponaredi rezultate (lažno pozitiven). Zaradi tega je treba pri tej vrsti setve paziti, da je punkcija edinstvena in da, ko jo odstranimo, izstopi v isti smeri, kot je vstopila.

Drugi test, ki ga je treba sejati z iglo, čeprav je pripravljen v klinasto obliko, je Kligler. V tem testu ni priporočljivo, da kisik prodre globoko v agar, saj je za določene kemične reakcije potreben medij, ki je slab s kisikom. Ta ročaj se uporablja tudi za dotikanje določene kolonije za namene subkultiviranja.

Ročaj lopatice

Večina mikroorganizmov daje mehke kolonije, ki jih je enostavno razgraditi. Vendar pa obstajajo nekateri mikrobni povzročitelji, katerih kolonije so trde in suhe, na primer mikobakterije na splošno in nekatere glive. V teh primerih je koristno uporabiti ročaj lopatice.

Ročaj v obliki črke L

Njegova najpogostejša uporaba je, da oponašamo glivične kulture, zlasti plesni.

Ostri ročaj konice

Koristno je za jemanje zelo majhnih kolonij v polmikrobnih kulturah, da bi jih lahko subkultirali.

Tehnike setve

Video 1

Sterilizacija ročaja platine

Ročaj mora biti pred in po uporabi steriliziran. Za sterilizacijo bakteriološke zanke v vžigalniku nadaljujte tako: ročaj je treba postaviti v zgornji del plamena in zavzeti čim bolj navpičen položaj tako, da se sterilizira od vrha navzgor.

Ko se fina nitka obarva svetlo rdeče, lahko rečemo, da je sterilna. Za uporabo ga ohladimo in odvzamemo izbrani vzorec. (Glej video 2).

Sterilizacija bakteriološke zanke

Video 2

Reference

1. Wikipedija "Bakteriološka zanka", The Free Encyclopedia. 23. julij 2019, 13:31 UTC. 18. avgust 2019, 22:45. Wikipedija.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrirani kovinski ročaji za mikrobiologe: Alternativa nacionalne proizvodnje. Sok, pridite. Mikrobiol. 2010; 30 (1): 37–42. Dostopno na: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. 5. izd. Uredništvo Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F in sod. Določitev analgetičnega učinka heksan izvlečka iz cvetov Eupatorium arsenei v modelu akutne bolečine pri podganah. mex. znanost. kmetija. 2015; 46 (1): 64–69. Dostopno na: scielo.org