ANTISTREPTOLIZIN O: KVANTIFIKACIJA, UTEMELJITEV, TEHNIKA, PATOLOGIJE - BIOLOGIJA - 2026

O ASO je protitelo nastane kot odgovor na okužbo s Streptococcus pyogenes, znan tudi kot Streptococcus betahemolitični A. Ta filter proizvaja dve eksotoksini s hemolitična klicema AKTIVNO streptolysins "S" in "O" povzročil .

Streptolizin S je odgovoren za beta hemolizo, ki se pojavi v krvnem agaru in čeprav je strupen za nekatere celice imunskega sistema, ni antigen. Medtem ko je streptolizin O, ki je labilen proti kisiku, odgovoren za hemolizo, ki se pojavi pod krvnim agarjem in je ta antigena.

Streptococcus pyogenes / Diagram dogajanja v ASTO testu (aglutinacijska reakcija). (Protitelesa, vezana na delce lateksa, ki vsebujejo specifični antigen). Vir: Uporabnik: Graham Beards / Alejandro Porto

Zato, ko celice imunskega sistema medsebojno delujejo s streptolizinom O, nastane specifičen imunski odziv, ki povzroči aktivacijo limfocitov B. Te celice proizvajajo protitelesa, usmerjena proti streptolizinu O. Zato protitelesa imenujemo antistreptolizin O.

Streptococcus pyogenes povzroča različne patologije, med katerimi so: tonzilitis, erizipele, impetigo, puerperalna vročina, škrlatna vročica in septikemija. Protitelesa proti streptolizinu O se pojavijo 8 do 30 dni po začetku okužbe.

Večina teh okužb je v populaciji zelo pogosta, zato je pri ljudeh običajno, da imajo v krvi antistreptolizinski O protitelesa. Nizki titri kažejo na preteklo okužbo s to bakterijo, visok ali naraščajoč titer pa kaže na nedavno ali trajno okužbo.

Kvantifikacija antistreptolizinskih O protiteles

V laboratoriju lahko s serološkim testom izmerimo titer protiteles proti streptolizinu "O". Test antistreptolizina O (ASTO) temelji na reakciji aglutinacije z lateksom.

To je mogoče narediti pol količinsko, poročanje s križci ali titer pa je mogoče tudi količinsko določiti. Normalno je in ni pomembno, da najdemo vrednosti do 200 ie / ml ali Toddove enote / ml. Nad to vrednostjo velja, da je pozitivna in klinično pomembna.

Ta test ne zahteva, da bolnik posti. Serum se uporablja kot vzorec, to je, da se bolnikova kri odvzame in položi v cev brez antikoagulanta, nato pa jo centrifugira, da dobimo serum.

Osnove tehnike ASTO

V tehniki se delci lateksa uporabljajo kot podpora za fiksiranje antigena streptolizina O. Absorbirani delci antigena reagirajo z bolnikovim serumom. Če ima bolnik antistreptolizin O protitelesa, se ta vežejo na antigen, vezan na delček lateksa.

Ta vezava povzroči aglutinacijo, ki je makroskopsko vidna. Intenzivnost reakcije je neposredno sorazmerna s koncentracijo prisotnih protiteles.

Tehnike

- Polkvantitativna tehnika

Intenzivnost reakcije je lahko v kredih polkvantificirana. V ta namen se vzame in postavi serološka reakcijska plošča:

50 μl seruma in 50 μl ASTO reagenta. Dobro zmešajte z leseno zobotrebcem in postavite v avtomatski mešalnik za 2 minuti. Opazujte. Če samodejni rotator ni na voljo, ga je treba opraviti ročno.

Interpretacija

Vzmetenje brez grudic (enakomerno): negativno

1. + = šibka reakcija

2. ++ = rahla reakcija

3. +++ = zmerna reakcija

4. ++++ = močna reakcija

Pozitivne serume s 3 in 4 križi je mogoče določiti količinsko.

- Kvantitativna tehnika

Za količinsko določitev titra izvedemo serijske razredčitve 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

To storite tako: vzamemo 4 epruvete ali Kahnove epruvete in nanje postavimo 0,5 ml fiziološke fiziološke raztopine. Nato se v prvo epruveto doda 0,5 ml bolnikovega seruma. Dobro meša. Ta cev ustreza razredčitvi 1: 2.

Nato se 0,5 ml prenese v epruveto 2 in dobro premeša. Ta cev ustreza razredčitvi 1: 4 in tako naprej, dokler ne dosežemo želenega redčenja.

Vzemite 50 μl vsakega redčenja in reagirajte s 50 μl reagenta ASTO na ploščici za aglutinacijo, kot je razloženo v polkvantitativni tehniki.

Interpretacija

Upošteva se največje razredčenje, pri katerem opazimo vidno aglutinacijo. Izračuni se izvedejo na naslednji način:

ASTO = obratna največja pozitivna razredčitev x občutljivost tehnike (konstanta).

Primer: Bolnik s pozitivno reakcijo do 1: 8

ASTO = 8 x 200 ie / ml = 1600 ie / ml ali enote Todd / ml.

Referenčna vrednost

Običajna odrasla oseba: do 200 ie / ml

Normalni otroci: do 400 ie / ml

priporočila

Priporočljivo je, da se pri bolnikih namesti pozitivna in negativna kontrola, ki zagotavlja, da je reagent v optimalnem stanju. Če pozitivna kontrola ne aglutinira ali negativna kontrolna aglutinata, reagenta ni mogoče uporabiti.

Reakcijo je treba razlagati po 2 minutah, po tem času pa ni veljavna, če pride do aglutinacije. To so lažni pozitivni rezultati.

Hiperlipemični serumi motijo ​​reakcijo. Lahko dajo lažne pozitivne rezultate.

Izolirana vrednost ASTO ni ravno v pomoč. Spremljati ga morajo simptomi.

Poleg tega je priporočljivo opraviti vsaj 2 meritev ASTO, kadar obstaja sum na revmatično vročino ali post-streptokokni glomerulonefritis, da bi dokazali zvišanje ravni antistreptolizina O in s tem potrdili diagnozo.

Patologije z visokimi titri antistreptolizina O

Protitelesa proti streptolizinu se zvišajo po trpljenju s Streptococcus pyogenes ali okužbo s hemolitično Streptococcusom skupine A.

Med njimi so: akutni faringitis, škrlatna vročica, impetigo, erizipele, puerperalna vročina in septikemija.

Nekateri bolniki, ki so trpeli zaradi nedavnih ali ponavljajočih se streptokoknih okužb, lahko razvijejo avtoimunske bolezni kot posledico ali zaplet po streptokokni okužbi, kot sta akutni glomerulonefritis in revmatična vročina.

Post streptokokne avtoimunske bolezni

Revmatična mrzlica

Gre za vnetni zaplet ali posledice, ki se lahko pojavijo 1 do 5 tednov po okužbi s streptokokom. Titri antistreptolizina O se znatno povečajo 4 do 5 tednov po začetku bolezni.

Visok titer ASTO vodi diagnozo, vendar ni povezan z resnostjo bolezni in njeno zmanjšanje ne pomeni izboljšanja.

Protitelesa antistreptolizina O navzkrižno reagirajo proti kolagenom in mišičnim vlaknom, med drugim vplivajo na nekatere organe (srce, kožo, sklepe in živčni sistem).

Ta zaplet ali posledice se pojavijo pri srčnem posegu, zvišani telesni temperaturi, slabo počutju, ne suppurativnem migracijskem poliartritisu, horeji itd.

Akutni glomerulonefritis

Akutni glomerulonefritis je ne-gnojni sequela, ki nastane zaradi odlaganja kompleksov antigen-protitelo na bazalni membrani glomerula.

Nastanek in kroženje kompleksov antigen-protitelesa (ag-ac), ki nastanejo zaradi streptokoknih okužb, lahko povzročijo eksudativne spremembe in vnetje glomerulov, s proteinurijo in hematurijo.

Ti ag-ac kompleksi se odlagajo v glomerulus in aktivirajo kaskado komplementa, kar ima za posledico poškodbe glomerularnega endotela. Zaradi tega velja za avtoimunsko bolezen, saj posameznikov imunski sistem poškoduje lastna tkiva.

Protitelesa proti antreptoptolizinu O so zelo visoka, ravni komplementa pa nizke.

Reference

1. Wiener Laboratories. ASO lateks. 2000. Dostopno na naslovu: wiener-lab.com.ar
2. Sodelavci Wikipedije. "Anti-streptolizin O." Wikipedija, prosta enciklopedija. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23. januarja 2019. Splet. 19. julij 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Titer antistreptolizina O v zdravju in bolezni: ravni in pomen. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Na voljo v: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Kako uporabljati titer antistreptolizina O. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231–8. Na voljo v: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. (5. izd.). Argentina, uredništvo Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Priročnik medicinske mikrobiologije. 2. izdaja, Venezuela: Direktorat za medije in publikacije Univerze v Carabobu.