- Sestava potopnega olja
- Značilnosti potopnega olja
- Osnove potopitvenega olja
- Uporabe ali aplikacije
- Ukrepi za opazovanje pripravka s potopnim oljem
- Nega
- Reference
Potapljanjem olje je viskozna bistra tekočina ima lomni količnik visoka. Zaradi tega se pogosto uporablja pri mikroskopskih opazovanjih, saj zagotavlja lastnost koncentriranja svetlobe, ko prehaja skozi cilj 100X mikroskopa, povečuje svojo ločljivost.
Do tega pride, ker se med objektivom in razmazom oblikuje viskozen film, ki preprečuje, da bi se svetlobni žarki razkropili, ko dosežejo zrak in tako koncentrirajo svetlobne žarke proti vzorcu.
Kapljica s potopitvijo olja in mikroskopom osredotočena s ciljem 100X z uporabo potopitve olja. Vir: Pixabay.com
Potopno olje se uporablja samo s ciljem 100X. Zato se cilj 100X imenuje tudi potopni cilj. Preostali so znani kot suhe tarče. Te leče ni mogoče uporabiti brez potopitvenega olja, saj brez nje vizualizacija ne bi bila zadovoljiva.
Glavna funkcija potopnega olja je zagotoviti jasnejše, ostrejše in bolj definirane slike, kar omogoča opazovanje podrobnosti, ki z drugimi objektivi ne bi bilo mogoče.
Prvo olje, uporabljeno v ta namen, je bilo janeževo olje, uporabljeno skupaj s prvo potopno lečo, ki jo je ustvaril Giovanni Battista Amici. To je le preprečilo kromatično aberacijo, a ni povečalo številčne odprtine sistema leč.
Potem so uporabljali cedrovo olje, vendar je imelo veliko pomanjkljivosti, ki so ga prisilile k njegovi uporabi. Med njimi je bila tudi njegova visoka kislost, ki je kratkoročno škodila ciljem.
V nadaljevanju so bile uporabljene druge snovi, kot sta voda in glicerin, dokler niso nastala sintetična potopna olja, ki so jih malo po malo rafinirali, dokler niso dosegli trenutnega potopnega olja, ki je kompleksna spojina organskih snovi.
Sestava potopnega olja
Potopno olje je sestavljeno iz mešanice organskih spojin, kot so: terfenil, hidrogenirani terfenil, naravni ogljikovodiki in polibuteni.
Značilnosti potopnega olja
Potopno olje je svetlo rumena tekočina, rahlo viskoznega videza, z značilnim vonjem in gostoto med 0,92 do 0,99 g / cm 3 .
Potopno olje ni topno v vodi in ima vrelišče 340 ° C. Indeks loma a (n 20 ° C / D): znaša od 1.482 do 1.516. Medtem je indeks bliskavice 110 ° C, viskoznost pa se giblje od 100 do 120 mPa.s.
Ta izdelek je treba odstraniti pravilno, saj je ekotoksičen. Z drugimi besedami, škoduje okolju in prizadene predvsem vodne živali. Po drugi strani pa draži kožo in sluznico. Če ga zaužijemo, je nefrotoksičen in kardiotoksičen.
Potopno olje je stabilno pri 15 do 25 ° C, temperatura, pri kateri ga je treba hraniti.
Osnove potopitvenega olja
Pri uporabi leč z večjimi povečavami je treba povečati jakost svetlobe. Vendar se mnogo svetlobnih žarkov izgubi, ker se razpršijo, ko dosežejo zrak (prostor med pokrovom in lečo), celo nekateri žarki se popolnoma odražajo.
Potopno olje ima indeks loma podobno kot steklo. Zato, ko olje pride v stik med lečo 100X in pokrovom, se svetlobni žarki koncentrirajo.
Koncentrirani žarki prehajajo skozi vzorec in izostrijo sliko, torej povečajo numerično odprtino cilja in popravijo kromatične in sferične aberacije.
Uporabe ali aplikacije
Uporaba potopnega olja je še posebej potrebna, kadar je treba sliko opazovati na širši način, pri čemer uporabite najvišji cilj povečave (cilj 100X), da vidite podrobnosti, ki so bistvene za postavitev diagnoze.
Zato se pogosto uporablja v mikroskopskih študijah na različnih področjih, kot so: histologija, citologija, hematologija in bakteriologija. Na primer, uporabno je za preučevanje značilnosti celic in tkiv pacienta.
Uporablja se tudi za analizo krvnih razmikov, kjer želimo podrobno določiti značilnosti hemoparazitov znotraj in zunaj eritrocitov ter v pripravkih po Gramu za določitev morfotintorialnih značilnosti mikroorganizmov.
Običajno se uporablja v fiksnih pripravkih, saj se v svežih pripravkih ne priporoča. To je zato, ker površinska napetost olja povzroči premik pokrova, zaradi česar se vzorec med opazovanjem premika in preprečuje analizo.
Po drugi strani potopno olje ni uporabno le pri običajni svetlobni mikroskopiji: uporablja se tudi v mikroskopih s skupno fluorescenco notranje refleksije (TIRFM) in v konfokalnih aplikacijah s fluorescenco.
Ukrepi za opazovanje pripravka s potopnim oljem
Če si želite ogledati diapozitiv pod mikroskopom, ga je treba najprej usmeriti s ciljem najmanjše povečave, navadno 10X, z nizko intenzivnostjo svetlobe.
Nato gre do cilja 40X in pot svetlobe se rahlo poveča. Pri tej povečavi je mogoče opraviti nekatere analize, vendar je za ogled podrobnosti o strukturi potrebno 100-kratno povečavo.
Preden se premaknete na cilj 100X, na pokrovček položite kapljico potopnega olja, tam, kjer ga želite opazovati, nato pa steklenico mikroskopa premaknete, da bi našli 100-kratni cilj v pripravi.
Intenzivnost svetlobe se uravnava (poveča) (s premikanjem kondenzatorja in odpiranjem membrane). Potem se mora nekaj majhnih premikov vijaka mikrometra (naprej ali nazaj) popolnoma osredotočiti, če mikroskop uporablja parafokalne cilje.
Če poskusite pripravek usmeriti neposredno s potopno lečo, boste morda imeli težave z iskanjem. Ne gre za nemogoče ukrepanje, vendar se teža znatno poveča.
Nega
Za uporabo potopnega olja je treba upoštevati nekatere pogoje.
Po izdelavi barvnega pripravka, na primer razmazanega z Giemsa ali Gram, počakajte, da se razmaz popolnoma posuši, preden nanesete potopno olje. V nasprotnem primeru bo olje skupaj z vodo tvorilo micele, ki pripravka ne bodo mogli videti.
Po drugi strani pa je treba po opazovanju serije pripravkov, torej na koncu delovnega dne, cilj 100X skrbno očistiti in uporabiti papir za leče z etanolom. Če leča ostane umazana, se bo olje na njej posušilo, nato pa jo boste zelo težko odstranili in tako poškodovali vidno polje.
Prav tako je treba upoštevati, da je olje vnetljivo in ga je treba hraniti proč od virov toplote (vžigalnikov). Pomembno se je izogibati ogrevanju nad 65 ° C.
Končno je olje strupen izdelek. Zato se je treba izogibati neposrednemu stiku s kožo in sluznico, kjer lahko povzroči rahlo draženje. Da bi se izognili nesrečam, priporočamo uporabo rokavic in varnostnih očal.
V primeru stika z oljem je treba območje sprati z veliko vode. Če olje brizga v oči, ga je treba sprati na enak način, tako da bodo oči odprte. V primeru nenamernega zaužitja je pomembno zaužiti toplo vodo in izzvati bruhanje, poleg tega pa pojdite k najbližjemu zdravniku.
Reference
- "Skupen fluorescenčni mikroskop z notranjo refleksijo." Wikipedija, prosta enciklopedija. 30. dec 2018, 22:46 UTC 14. maj 2019, 01:54
- IVD. Mikroskopska potopitev olja. Na voljo na: Uporabniki / Ekipa / Prenosi.
- Okoljska biologija in mikrobiologija. Delovanje optičnega mikroskopa. Dostopno na: eumed.net/libros.
- Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Zgodovina mikroskopa in njegov vpliv na mikrobiologijo. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355–372. Na voljo v: scielo.
- Herrero J. praksa št. 1: Osnove in uporaba skupnega optičnega mikroskopa. Universitat d´Alacant Na voljo na: rua.ua.es/dspace
- Scharlau - MSDS. Potopno olje, za mikroskopijo. 2001. Dostopno na: insumos-labcentral.